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文檔簡介
1、<p><b> 外文資料翻譯</b></p><p> CHITOSAN on andraeanum tissue inhibition of bacteria</p><p> contamination</p><p> Abstract: The fungi was isolated and purified from
2、 polluted anthurium subculture medium, identified to be DeuteromycotinaHyphpmycetes Hyphomycetales Dematiaceae and trichoderma. The inhibition effect of the three kinds of chitosan on the fungi wasconducted.The results s
3、howed that the chitosan had inhibition effect on the fungi. The higher concentrations of chitosan had a betteinhibition effect than the lower ones.The inhibition effect of 50000 and 250000 molecular weight chitosan is be
4、tter than </p><p> Key words: tissue culture; contamination; Chitosan; inhibition effect </p><p> Plant tissue culture, not only in plant breeding, rapid propagation of seedlings and the produ
5、ction of useful secondary metabolites, such as the use of a wide range of plant genetic engineering is and Plant Molecular Biology, one of the important foundation for the study [1]. Pollution, browning, glass and tissue
6、 culture are the main problems, including pollution of the most common [2]. Therefore take effective prevention and control measures to reduce the chance of contamination occurred, tissu</p><p> 1 Materials
7、 and Methods 1.1 Test materials 1.1.1 Isolates Streptomyces bacteria pollution (code-named WCHPA), separated from the laboratory contamination andraeanum subculture medium. 1.1.2 Test for Drugs Chitosan, a Z
8、hejiang Xing Biotechnology Australia Limited, a molecular weight of 3kd (degree of deacetylation> 80%), 50kd (degree of deacetylation> 90%), 25kd (degree of deacetylation> 90%)[6]. 1.1.3 Medium PDA medium P
9、otatoes 200g, glucose 20g, agar 20g, distilled water 1000m</p><p> Qiu-ping [11], The results show that the antimicrobial effect of chitosan with its concentration increases, the experimental results suppor
10、t the results of the study. A wide range of applications of chitin, chitosan in the medical, food, environmental protection, in areas such as chemical products have wide-ranging and important applications. Chitosan flowe
11、rs will be used for tissue culture would be very good prospects.</p><p> References</p><p> [1]MK.Razdan. Zun-Xiao-an, ZHU Yang translation. Introduction to Plant Tissue Culture [M]. Beij
12、ing: Chemical Industry Press ,2006:1-2. </p><p> [2]Hu, ZHANG Li-jun,baixuemei, et al. Plant Tissue Culture Pollution Analysis and the disinfection of explants [J]. Anhui Agricultural Science, 2007,35 (3) :
13、680-681. </p><p> [3]Yi-Ting Wang,wanglianping , Mou Hero, et al. Industrial production of tissue culture studies of pollution and its control [J]. Anhui Agricultural Science, 2005, 33 (12): 2357 - 2358. &l
14、t;/p><p> [4]Chiang big. Chitin [M]. Beijing: China Environmental Science Press, 1996.</p><p> [5]Fu Tian Xia, LIU Xiao-yu, Liu Zhiheng. Chitosan's antibacterial properties of the progress of
15、 applied research [J]. Liaoning Chemical, 2005,1234 (12) :541-544. </p><p> [6]Yu Hanshou, Wu Zhang, Yang Bing. Chitosan inhibit research progress of plant diseases[J].Natural products research and developm
16、ent,1999,12 (3) :94-97.</p><p> [7]Li Fang,shishaowei. Chitosan Preparation and application in the food industry Mechanism [J]. Food and Drug, 2006 (03A) :19-22. </p><p> [8]Wu, Xia water. Non
17、-biological factors on the antibacterial activity of chitosan [J]. Food Science, 2004,25 (7) :53-55. </p><p> [9]wuxiaoyong, Qing-Xiao Zeng, MOshaofang. Several of the antibacterial properties of chit
18、osan [J]. Food and Fermentation Industry, 2005,206 (2) :18-21.</p><p> [10]Hu, ZHANG Li-jun,baixuemei, et al. Plant Tissue Culture Pollution Analysis and the disinfection of explants [J]. Anhu
19、i Agricultural Science, 2007,35 (3) :680-681. </p><p> [11]Qiu-ping, Chitosan on mango Colletotrichum gloeosporioides, Diplodia antagonism bacteria [J]. Food and machinery, 2005,21, (1) :25-27.&l
20、t;/p><p> 殼聚糖對紅掌組培污染菌的抑制作用</p><p> 摘要:在污染的紅掌繼代培養(yǎng)基中提取污染菌并進行了分離及純化,初步鑒定為為半知菌亞門(Deuteromycotina),絲孢綱(Hyphpmycetes),絲孢目(Hyphomycetales),淡色孢科(Dematiaceae),木霉屬(trichoderma)。研究了殼聚糖對該菌的抑制作用,探索了3種分子量及其6種濃
21、度的殼聚糖對該菌的抑制效果。結(jié)果表明:殼聚糖對該污染菌有抑制作用,5 萬和 25 萬分子量的抑菌效果高于 3000 分子量,濃度越高,抑菌效果越好。初步證實了殼聚糖對組培污染菌類有很好的抑制作用,在花卉組織培養(yǎng)污染防治方面具有應(yīng)用價值。 </p><p> 關(guān)鍵詞:組織培養(yǎng);污染;殼聚糖;抑制作用 </p><p> 植物組織培養(yǎng)不僅在植物育種、 苗木快速繁殖和有用次生代謝產(chǎn)物生產(chǎn)等方
22、面應(yīng)用廣泛,也是植物基因工程和植物分子生物學(xué)研究的重要基礎(chǔ)之一[1]。污染、褐化、玻璃化等是組織培養(yǎng)存在的主要問題,其中污染最普遍 [2]。因此采取有效的防控措施,降低污染發(fā)生的機率,是組織培養(yǎng)成功的重要保障。殼聚糖(chitosan)是甲殼素在強堿性條件下進行脫乙?;饔煤笮纬傻囊环N重要的衍生物, 是由多個N-乙酰氨基葡萄糖通過β-(1-4)糖苷鍵連接起來,但它的性質(zhì)較為活潑。殼聚糖具有天然抑菌性能,且抑菌譜廣,近年來殼聚糖在各個領(lǐng)域
23、如農(nóng)業(yè)、醫(yī)學(xué)[3]、制造[4]、食品[5]等方面中的運用受到很大的重視。有關(guān)殼聚糖在組織培養(yǎng)中的抑菌應(yīng)用尚未見報道。本實驗擬從污染的紅掌繼代培養(yǎng)基中提取、純化污染菌并進行鑒定, 用不同分子量及其不同濃度的殼聚糖對其進行抑制實驗, 摸索出抑菌效果最好的殼聚糖分子量及最佳抑菌濃度,為探索殼聚糖成為新型的抑菌劑提供具體信息。 </p><p><b> 1 材料與方法</b></p>
24、<p> 1.1 試驗材料 </p><p> 1.1.1 供試菌株 </p><p> 霉菌污染菌(代號 WCHPA),分離于實驗室污染的紅掌繼代培養(yǎng)基中。 </p><p> 1.1.2 供試藥品 </p><p> 殼聚糖,有浙江澳興生物科技有限公司提供,分子量為3kd(脫乙酰度〉80%) ,50kd(脫乙
25、酰度〉90%),25kd(脫乙酰度〉90%)[6]。 </p><p> 1.1.3 培養(yǎng)基 PDA培養(yǎng)基 </p><p> 土豆200g,葡萄糖20g,瓊脂20g,蒸餾水1000ml,pH值自然。 </p><p> 1.2 試驗方法 </p><p> 1.2.1 污染菌的分離及純化 </p><p&
26、gt; 在超凈工作臺中挑出紅掌繼代培養(yǎng)基中的污染真菌,接到PDA培養(yǎng)基中。重復(fù)若干次,直至菌落特征及其顯微形態(tài)不再有變化,可確定菌種已純化。 </p><p> 1.2.2 污染菌的鑒定 </p><p> 連續(xù)觀察純化后的菌落形態(tài)。制作裝片,進一步形觀察菌株、菌絲、孢子、產(chǎn)孢細胞的形態(tài)及產(chǎn)孢細胞的產(chǎn)孢方式和形態(tài)等,用數(shù)碼顯微鏡進行拍照。 </p><p>
27、 1.2.3 抑菌試驗 </p><p> 稱取不同分子量殼聚糖用 1M 的乙酸溶液溶解后與PDA培養(yǎng)基混合,制成殼聚糖終濃度分別為(0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0)mg/ml 的培養(yǎng)基,用 1M 的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié) pH 值為 6.0,對照除不加殼聚糖外,其他與加有殼聚糖的培養(yǎng)基相同[7]。高壓滅均鍋121℃下滅菌30min后倒平皿。產(chǎn)生白色菌絲24h后變?yōu)榫G色繼而變?yōu)楹稚?,菌絲發(fā)達,絨狀
28、,培養(yǎng)3d左右,在褐色菌絲中間有白色絮狀的菌毛產(chǎn)生。菌絲有隔,分生孢子梗長,產(chǎn)生側(cè)向分枝,分生枝上輪生短的產(chǎn)孢瓶體。分生孢子單胞卵圓形、光滑。 </p><p><b> 2 結(jié)果與分析 </b></p><p> 2.1 紅掌繼代培養(yǎng)基污染癥狀 </p><p> 在紅掌繼代培養(yǎng)基中長出褐色的菌毛,培養(yǎng)基表面呈黑色,褐色的菌絲上間有白
29、色絮狀的菌絲。 </p><p> 2.2 真菌純培養(yǎng)的形態(tài)特征及鑒定結(jié)果 </p><p> 菌落在 PDA 培養(yǎng)基上等徑生長,邊緣整齊,孢子萌發(fā)加入殼聚糖的PDA培養(yǎng)基,4d后能明顯觀察到菌落周圍有黑色暈圈,且黑色暈圈隨著菌落的生長而向外移。一般抑菌效果越好黑色暈圈越明顯[8]。對照菌落始終沒有出現(xiàn)這種現(xiàn)象。殼聚糖的分子量和濃度影響抑菌效果。 </p><p&g
30、t; 2.3相同濃度的三種分子量殼聚糖抑菌效果的比較</p><p> 濃度為0.5mg/ml 3種分子量殼聚糖對WCHPA菌落的抑制效果 6個濃度3種分子量殼聚糖對WCHPA菌落的抑菌率結(jié)果0.5mg/ml 濃度的 3 種分子量殼聚糖之間沒有明顯的規(guī)律, 最高抑菌率出現(xiàn)在分子量為5萬的殼聚糖培養(yǎng)基中為20.45%。抑菌率和時間上也沒有緊密的聯(lián)系。結(jié)果表明在0.5mg/ml 濃度下3種分子量的殼聚糖的抑菌效果
31、都不理想[9]。第5d之前3種分子量殼聚糖分子量越大抑菌率越高,而且都是隨著時間的延長抑菌率降低。在第5d,3000 分子量的抑菌率超過其它兩種分子量的抑菌率,而3000分子量的抑菌率也達到最高值。在第7d后抑菌效果和第5d之前的相似,分子量越大抑菌率越高。</p><p><b> 3 討論與結(jié)論 </b></p><p> 3.1 殼聚糖成為新型抑菌劑的可能
32、 </p><p> 植物組培的污染大致可分為兩種,一種是操作中產(chǎn)生得污染,主要是霉菌的污染;一種是外植體自身所帶雜菌主要是由真菌和細菌的污染[10]。高抑菌率高達79.55%??股厥乾F(xiàn)在組培中最常見,分子量對殼聚糖抗菌性能有重要影響,從實驗結(jié)果來看5萬和 25 萬殼聚糖的抑菌效果要好于3000 分子量的;最高抑菌率出現(xiàn)在 25 萬分子量 3.0mg/ml和 2.0mg/ml 兩個濃度中。但總體考慮到價格及其
33、操作因素上本實驗的結(jié)論是5萬分子量1.5mg/ml濃度為最佳。 </p><p> 3.2 濃度對殼聚糖抗菌性能有重要影響 </p><p> 鐘秋平[11]的研究結(jié)果均表明殼聚糖的抑菌作用隨其濃度的增加而增大,本實驗結(jié)果支持上述研究結(jié)果。 甲殼素應(yīng)用范圍廣泛,殼聚糖在醫(yī)學(xué)、食品、環(huán)保、日化用品等領(lǐng)域都有著廣泛而重要的應(yīng)用。將殼聚糖用于花卉組織培養(yǎng)將有很好的前景。</p>
34、<p><b> 參考文獻</b></p><p> [1]M.K..Razdan.肖尊安,祝揚譯.植物組織培養(yǎng)導(dǎo)論[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2006:1-2. </p><p> [2]胡凱,張立軍,白雪梅,等.植物組織培養(yǎng)污染原因分析及外植體的消毒[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2007,35(3):680-681. </p><p
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