人博卡病毒在健康獻(xiàn)漿人群中的基因組和血清學(xué)抗體流行情況研究.pdf

1、碩士學(xué)位論文人博卡病毒在健康獻(xiàn)漿人群中的基因組和血清學(xué)抗體流行情況研究所院：姓名：指導(dǎo)教師：導(dǎo)師小組：學(xué)科專業(yè)：研究方向：完成日期：輸血研究所李紅學(xué)李武平教授李武平陳利民何苗教授病原生物學(xué)人博卡病毒的分子流行病學(xué)2014年5月中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院碩士研究生學(xué)位論文人博卡病毒在健康獻(xiàn)漿人群中的基因組和血清學(xué)抗體流行情況研究摘要目的了解中國(guó)健康獻(xiàn)漿人群、原料血漿和血液制品中人博卡病毒(Humanbocavims，HBoV)的基因組和

2、血清學(xué)抗體的流行情況以及遺傳多樣性特征。方法基于ABI7900HTFastRealTimePCRSystem平臺(tái)，建立檢測(cè)HBoVDNA的特異性、敏感性RealTimePCR(SYBRGreen法)方法。并根據(jù)此方法對(duì)從血液制品公司收集到的健康獻(xiàn)漿人群的單人份血漿(不同月份共6096份)以及本實(shí)驗(yàn)室中保存的原料血漿(共241份)和血液制品[共326份，包含白蛋白65份，靜脈注射丙種球蛋白(intravenousimmunoglobuli

3、n，IVIG)197份，凝血因子VIII(factorVIII，F(xiàn)vm)47份，纖維蛋白原(fibrinogen，F(xiàn)g)12份，蛋白酶原復(fù)合物(prothrombincomplexconcentrate，PCC)5份1進(jìn)行HBoVDNA的篩查，并用NestedPCR的方法進(jìn)行確認(rèn)。巢式確認(rèn)陽(yáng)性后樣本進(jìn)行820bp片段的巢式PCR擴(kuò)增、測(cè)序并進(jìn)行遺傳多樣性分析。同時(shí)，對(duì)209份血漿樣品(根據(jù)HBoV病毒載量分為3組：組1，病毒載量104c

4、opies／mL；組2，基因組陽(yáng)性但病毒載量104copies／mL；組3，基因組陰性)分別進(jìn)行血清學(xué)抗HBoVIgG和IgM抗體的篩查。結(jié)果HBoV在健康獻(xiàn)漿人群中的基因組流行率為906％，病毒載量范圍為501102_302x106copies／mL。241份原料血漿中有43份有HBoVDNA檢出，檢出率為1784％，其中3份病毒載量高于104copies／mL。326份血液制品中44份為HBoVDNA陽(yáng)性，陽(yáng)性率為1350％，其中2

5、份白蛋白(308％，2／65)、14份IVIG(711％，14／197)、26份FⅧ(5532％，26／47)和2份Fg(1667％，2／12)中HBoVDNA陽(yáng)性，5份PCC中未檢出HBoVDNA。不同病毒載量血漿中血清學(xué)抗體陽(yáng)性率分析表明，HBoV核酸檢測(cè)陽(yáng)性血漿中抗HBoVIgG抗體檢出率高于HBoV核酸陰性血漿，HBoV病毒高載量組血漿中抗HBoVIgM抗體檢出率高于HBoV陰性組。遺傳多樣性分析顯示在中國(guó)被檢地區(qū)健康獻(xiàn)漿人群中