雌性濟(jì)寧青山羊生后性發(fā)育特性與雌孕激素及其受體關(guān)系的研究.pdf

1、濟(jì)寧青山羊是我國一個(gè)優(yōu)秀地方品種，具有性成熟早和繁殖率高的特點(diǎn)。從激素和受體表達(dá)水平等角度研究青山羊性發(fā)育過程，對(duì)于闡明濟(jì)寧青山羊性成熟早的機(jī)理和培育新的高繁殖力山羊品種或品系等具有重要意義。本研究以雌性濟(jì)寧青山羊?yàn)檠芯繉?duì)象，應(yīng)用放射免疫、組織化學(xué)、免疫組織化學(xué)、透射電鏡、實(shí)時(shí)熒光定量PCR和WesternBlot等方法，從激素水平、細(xì)胞水平、亞細(xì)胞水平和分子水平等層面系統(tǒng)研究從出生到性成熟山羊血液中雌孕激素的波動(dòng)、雌孕激素受體在下丘腦

2、-垂體-卵巢軸以及雌孕激素受體在生殖器官發(fā)育過程中的增齡性分布特點(diǎn)及變化規(guī)律。研究結(jié)果顯示，在雌性濟(jì)寧青山羊生后發(fā)育階段:①下丘腦與生殖有關(guān)的核團(tuán)均有ER和PR陽性細(xì)胞分布，各核團(tuán)ERα、ERβ和PR陽性細(xì)胞隨日齡增長而數(shù)量增多，且同一日齡同一核團(tuán)內(nèi)ERβ陽性著色明顯強(qiáng)于ERα(p＜0.05)。PR免疫反應(yīng)陽性神經(jīng)元的分布和變化規(guī)律與ERβ基本一致。ERα、ERβ和PR陽性細(xì)胞在下丘腦中分布的增齡性變化與濟(jì)寧青山羊性發(fā)育和性早熟的特點(diǎn)密

3、切相關(guān);②腺垂體嗜色細(xì)胞隨著年齡增長而數(shù)量增多，體積增大;ERα主要分布于嗜色細(xì)胞的細(xì)胞核，ERβ和PR主要分布于部分嗜色細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì);初情期(D60)，垂體嗜色細(xì)胞進(jìn)入形態(tài)學(xué)快速生長期，ERα和ERβ的表達(dá)明顯上調(diào)。PR陽性細(xì)胞AOD的峰值出現(xiàn)在D120，此時(shí)青山羊已達(dá)性成熟，PR的高表達(dá)與垂體的功能狀態(tài)同步;③卵巢具有發(fā)育快和成熟早的特點(diǎn)，初生母羔的卵巢內(nèi)即有生長卵泡，ERα、ERβ和PR的合成及其mRNA的表達(dá)均較高。出生至30日

4、齡，為卵巢形態(tài)上的快速生長發(fā)育期，重量和體積均顯著增加，內(nèi)、外皮質(zhì)區(qū)的分帶消失。60～90日齡，為卵巢機(jī)能上的發(fā)育完善時(shí)期。60日齡已排卵，出現(xiàn)黃體或白體，進(jìn)入初情期，ERα、ERβ和PR及其mRNA的表達(dá)明顯上調(diào);90日齡為性成熟期，成熟卵泡最大直徑可達(dá)6.18mm;除ERα表達(dá)下調(diào)外，ERβ和PR及其mRNA的表達(dá)均維持在高水平狀態(tài)。初情期之前，卵巢雌激素的優(yōu)勢(shì)受體為ERα，性成熟后則為ERβ;④不同日齡子宮內(nèi)均有ERα、ERβ和P

5、R及其mRNA的表達(dá)。ERα、ERβ和PR蛋白免疫陽性產(chǎn)物定位于子宮腔上皮細(xì)胞、腺上皮細(xì)胞、基質(zhì)細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞及平滑肌細(xì)胞的核中。ERα和ERβ表達(dá)從60日齡明顯增多，90日齡最多。出生以后，PR出現(xiàn)兩個(gè)高峰點(diǎn)是120日齡和180日齡。ER和PR及其mRNA在出生后不同發(fā)育階段子宮內(nèi)的分布及表達(dá)狀況，為山羊的多胎性提供良好的子宮內(nèi)環(huán)境;⑤輸卵管壺腹部和傘部上皮內(nèi)存在ERα、ERβ、PR、FSHR和LHR，并且這些受體在輸卵管上皮發(fā)育

6、過程中的表達(dá)具有時(shí)空特異性。性成熟前(D0～D60)，山羊下丘腦-垂體-卵巢軸尚未發(fā)育成熟，輸卵管壺腹部和傘部上皮中ERα、ERβ、PR、FSHR和LHR的表達(dá)少，陽性細(xì)胞積分光密度值低，性成熟(D90～D180)后，輸卵管上皮中ERα、ERβ、PR、FSHR和LHR的表達(dá)升高，激素受體與配體結(jié)合進(jìn)而調(diào)節(jié)輸卵管上皮細(xì)胞的分化發(fā)育，使壺腹部和傘部上皮中纖毛細(xì)胞和分泌細(xì)胞的數(shù)量增多，上皮細(xì)胞含有的糖原或粘液增多，上皮功能更加活躍。D150開