正己烷對卵巢雌、孕激素合成干擾及其機制研究.pdf

1、目的：
　　 正己烷(n-Hexane)是工業(yè)上廣泛使用的一種有機溶劑，其對女(雌)性生殖內(nèi)分泌的干擾作用近年來引起人們高度關(guān)注。研究并了解正己烷對卵巢顆粒細胞性激素合成的影響及其可能的分子機制對于正己烷職業(yè)危害的防治，尤其是對職業(yè)女工生殖危害的防治機制研究具重要意義，也必將為正己烷的毒作用機制研究提供重要參考。
　　 方法：
　　 本實驗研究主要通過正己烷對卵巢顆粒細胞性激素合成過程中三大重要環(huán)節(jié)的影響，對其作

2、用及其可能機制展開體內(nèi)外實驗研究。
　　 1.體內(nèi)染毒實驗：48只成年雌性Wistar大鼠按體重分層隨機分為4組，靜式吸入染毒。染毒劑量分別為：0、3.01、9.03、27.1g/m3。每天4小時，每周6天，持續(xù)6周。染毒結(jié)束后，觀察動情周期，待大鼠進入動情期，取血制備血清測定激素水平；取卵巢，提取顆粒細胞作體外培養(yǎng)，觀察不同劑量組正己烷染毒后大鼠卵巢顆粒細胞培養(yǎng)液中E2和P4的變化，并測定顆粒細胞StAR、P450scc和P4

3、50arom mRNA表達。
　　 2.體外染毒實驗：28天齡的未成年健康雌性Wistar大鼠，每只皮下注射孕馬血清促性腺激素(PMSG)100IU。48小時后提取顆粒細胞進行體外培養(yǎng)。采用正交設(shè)計表L16(45)設(shè)計正交實驗，研究不同染毒劑量2，5-己二酮(0、20、40、60 mmol/L)和染料木黃酮(0、15、30、60 umol/L)對卵巢顆粒細胞培養(yǎng)液中E2和P4的變化，并測定顆粒細胞StAR、P450scc和P45

4、0arom mRNA表達。
　　 結(jié)果：
　　 大鼠靜式吸入染毒實驗結(jié)果
　　 1.各劑量組大鼠動情周期呈明顯縮短趨勢(p＜0.05)，其中高劑量組大鼠動情期、動情間期明顯縮短，與對照組比較，差別有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)。
　　 2.大鼠血清E2、P4隨染毒劑量的增加呈下降趨勢，但與對照組相比差別無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05)。
　　 3.體內(nèi)染毒可降低各劑量組卵巢顆粒細胞體外分泌E2水平以及高

5、劑量組體外分泌P4水平(P＜0.05)，而刺激低劑量組P4分泌顯著升高(P＜0.05)。
　　 4.體內(nèi)染毒可抑制高劑量組的StAR mRNA和P450scc mRNA表達，而低劑量組的StAR mRNA和P450scc mRNA表達強度顯著高于對照組(P＜0.05)。
　　 5.各劑量組P450arom mRNA表達強度均低于對照組，且差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 卵巢顆粒細胞體外染毒實驗結(jié)果

6、>　　 1.低劑量2,5-HD組顆粒細胞培養(yǎng)液中E2和P4的含量顯著性升高(P＜0.05)，而中、高劑量組的E2含量呈下降趨勢，與對照組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 2.各劑量Gen組均能抑制顆粒細胞體外分泌E2和P4(P＜0.05)。2,5-HD和Gen對卵巢顆粒細胞分泌E2的影響存在交互作用，而對P4分泌不存在交互作用。
　　 3.低劑量2,5-HD組StAR mRNA和P450scc mRNA的表

7、達高于對照組(P＜0.05)。
　　 4.低劑量2,5-HD組P450arom mRNA表達強度高于對照組(P＜0.05)，而中、高劑量2,5-HD組P450arom mRNA表達強度均低于對照組(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1.正己烷具有明顯的雌性生殖內(nèi)分泌干擾作用，在本實驗條件下表現(xiàn)為：大鼠動情周期的異常變化(靜式吸入染毒6周后，高劑量組大鼠動情期、動情間期明顯縮短)、卵巢顆粒細胞性激素合成功能障礙

8、。
　　 2.正己烷可通過影響卵巢顆粒細胞雌、孕激素合成過程中StAR蛋白、P450scc和P450arom的表達進而干擾雌、孕激素的合成。這可能是正己烷的生殖內(nèi)分泌干擾作用的重要機制之一。
　　 3.正己烷可能存在“毒物低劑量興奮效應(yīng)”(3.01g/m3，靜式吸入染毒6周)，但其結(jié)果及確切機制尚有待進一步觀察。但較大劑量正己烷對孕激素合成水平的明顯抑制作用則不容忽視。
　　 4.大豆異黃酮對于低劑量正己烷顆粒細