肉種雞飼用硒代蛋氨酸的母體營養(yǎng)效應(yīng)及分子機(jī)理研究.pdf

1、試驗(yàn)研究了不同硒源和水平對(duì)肉用種母雞及其后代的生物學(xué)效應(yīng)，并比較了不同母源硒對(duì)發(fā)育雞胚各階段死亡率、抗氧化能力的影響及其對(duì)氧化應(yīng)激雞胚的保護(hù)作用，以揭示不同硒源差異性調(diào)控雞胚死亡率的分子機(jī)理，旨在闡明新型有機(jī)硒源-SM（selenomethionine，硒代蛋氨酸）的主要功能及其作用機(jī)制。
　　試驗(yàn)一不同硒源和水平對(duì)內(nèi)用種母雞及其后代的生物學(xué)效應(yīng)
　　本試驗(yàn)采用3×2完全隨機(jī)設(shè)計(jì)，即3種硒源（SS（sodium seleni

2、te，亞硒酸鈉）、SY（selenium-enrichedyeast，酵母硒）、SM）和2個(gè)硒水平（0.15和0.30 mgSe/kg）。試驗(yàn)選用48周齡健康嶺南黃父母代肉用種母雞540只，隨機(jī)分為6組，每組含3個(gè)重復(fù)，每重復(fù)30只。預(yù)試期2周，正試期8周。種雞基礎(chǔ)日糧硒含量為0.04 mg Se/kg。收集試驗(yàn)最后7天種蛋于18℃環(huán)境存放，常規(guī)孵化管理。孵化結(jié)束后，母源各重復(fù)隨機(jī)選取初生雛雞60只（共1080只）進(jìn)行飼養(yǎng)試驗(yàn)，飼喂相同

3、的商品日糧（添加亞硒酸鈉0.15 mg Se/kg，實(shí)測(cè)硒水平0.19 mg/kg）。于種雞飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束、種蛋孵化結(jié)束、肉雞飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束分別屠宰取樣分析。獲得主要結(jié)果如下:
　　(1)種雞飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)果表明:同比0.30 mg/kg水平，0.15 mg/kg水平顯著(P＜0.05)提高了種蛋孵化率，并有提高出雛率的趨勢(shì)(P＜0.1)。不同硒源對(duì)種母雞繁殖性能無顯著影響(P＞0.05)，但0.15 mg/kg水平SM組獲得了最佳的產(chǎn)蛋

4、率、受精率、受精蛋孵化率和出雛率。
　　(2)硒含量分析結(jié)果顯示:SM和（或）SY較SS提高了種母雞、發(fā)育雞胚、初生雛雞的血清或組織及種蛋的硒含量(P＜0.05);同比SY，SM提高了種母雞血清、種蛋、雛雞腎臟和肌肉的硒含量(P＜0.05)。0.30 mg/kg水平硒沉積量高于0.15 mg/kg水平(P＜0.05)。
　　(3)抗氧化水平測(cè)定結(jié)果表明:同比SS，SM和（或）SY顯著(P＜0.05)提高了種雞肝、腎CAT活力

5、、T-AOC及雛雞腎臟CAT活力，降低了種雞腎臟、胰臟和雛雞肝臟MDA含量。同比0.30 mg/kg水平，0.15 mg/kg水平顯著(P＜0.05)提高了種雞血清GPx、腎臟T-SOD活力及血清、肝臟和肌肉T-AOC（P＜0.05），降低了種雞血清、腎臟、肌肉和胰臟MDA含量(P＜0.05)，提高了雛雞肝臟GPx、T-SOD活力和T-AOC及腎臟T-SOD、CAT活力和T-AOC(P＜0.05)，降低了雛雞腎臟MDA含量(P＜0.05

6、)。
　　(4)后代肉雞生產(chǎn)性能結(jié)果顯示:同比SS，SM降低了21日齡后代肉雞料重比(P＜0.05);不同硒源和水平對(duì)56日齡后代肉雞生產(chǎn)性能無顯著影響(P＞0.05)，僅SM有降低56日齡后代肉雞料重比的趨勢(shì)(P＜0.1)。
　　(5)后代肉雞胴體組成和肉質(zhì)測(cè)定結(jié)果表明:不同硒源和水平對(duì)后代肉雞各胴體組成均無顯著影響(P＞0.05); SM較SS和SY顯著(P＜0.05)提高了后代肉雞胸肌16小時(shí)pH值。0.15 mg/k

7、g水平較0.30 mg/kg水平提高了后代肉雞胸肌8小時(shí)肉色Hunter a值及胸肌pH值（P＜0.05），降低了后代肉雞胸肌滴水損失率（P＜0.05）。
　　(6)種母雞和雛雞硒蛋白基因表達(dá)分析結(jié)果顯示:同比SS，SM和（或）SY提高了種雞肝臟GPx1 mRNA水平、TrxR1 mRNA水平和活力、SelP mRNA和蛋白水平(P＜0.05);提高了雛雞GPx1、TrxR1和SelP在肝臟的mRNA表達(dá)和活力或蛋白水平，以及在腎

8、臟的活力或蛋白水平(P＜0.05)。0.30 mg/kg水平較0.15mg/kg提高了雛雞肝臟TrxR1活力和雛雞肝、腎SelP的蛋白表達(dá)量(P＜0.05)。
　　上述結(jié)果提示:3種硒源互比，SM在改善種母雞繁殖性能、硒沉積、抗氧化水平以及后代前期生產(chǎn)性能等指標(biāo)上表現(xiàn)出更有效的作用，適宜添加水平為0.15 mg Se/kg。
　　試驗(yàn)二不同母源硒對(duì)發(fā)育雞胚死亡率和抗氧化能力的影響
　　本試驗(yàn)研究了不同母源硒對(duì)雞胚各階段

9、死亡率以及抗氧化水平的影響。40周齡健康嶺南黃父母代肉用母種雞270只被隨機(jī)分為3個(gè)處理，每處理5個(gè)重復(fù)。試驗(yàn)組分別飼喂在基礎(chǔ)日糧中添加了0.15 mg Se/kg SS或SM的日糧，以基礎(chǔ)日糧（硒水平0.04 mg/kg）作為對(duì)照(BD)。種雞試驗(yàn)預(yù)試期2周，正試期8周。收集試驗(yàn)最后7天的種蛋存放于18℃環(huán)境中，隨后常規(guī)孵化管理。取不同胚齡（9、14、19和21日）雞胚，解剖取樣分析。結(jié)果表明:
　　(1)同比BD，SM和SS降

10、低了孵化前、中、后及全期雞胚死亡率(P＜0.05);同比SS，SM降低了孵化后期雞胚死亡率（P＜0.05）。
　　(2)同比BD，SM和（或）SS提高了發(fā)育雞胚GPx、T-SOD和CAT活力及T-AOC(P＜0.05)，降低了發(fā)育雞胚M(jìn)DA和ROS含量(P＜0.05)。
　　(3)同比SS，SM提高了發(fā)育雞胚T-AOC、19和（或）21胚齡雞胚T-SOD及CAT活力（P＜0.05），降低了19、21胚齡雞胚M(jìn)DA和ROS含量

11、（P＜0.05）。
　　(4)同比BD，SM和（或）SS提高了14、19、21胚齡雞胚GPx1 mRNA水平和活力及TrxR1活力(P＜0.05);上調(diào)了19、21胚齡雞胚TrxR1 mRNA表達(dá)水平(P＜0.05);提高了發(fā)育雞胚SelP mRNA和蛋白表達(dá)量(P＜0.05)。
　　(5)同比SS，SM提高了19和（或）21胚齡雞胚GPx1、TrxR1、SelP mRNA水平和活力或蛋白水平(P＜0.05)。
　　上

12、述結(jié)果提示:母源硒對(duì)于雞胚正常生長發(fā)育、維持雞胚抗氧化功能是必不可少的。在孵化后期，SM的作用效果顯著優(yōu)于SS。
　　試驗(yàn)三雞胚氧化應(yīng)激模型的構(gòu)建
　　試驗(yàn)選取嶺南黃父母代肉種雞種蛋1000枚，隨機(jī)分為5組，每組5個(gè)重復(fù)。于孵化第17天給予6小時(shí)的37.5（對(duì)照組）、38.5、39.5、40.5和41.5℃刺激，其余時(shí)間均常規(guī)孵化管理。結(jié)果表明:當(dāng)刺激溫度達(dá)到39.5℃時(shí)，雞胚ROS和HSP70含量及抗氧化等特征性指標(biāo)均產(chǎn)生

13、了顯著性變化（P＜0.05），且種蛋孵化率無顯著影響，由此表明試驗(yàn)已成功建立了雞胚氧化應(yīng)激模型。
　　試驗(yàn)四母源硒對(duì)氧化應(yīng)激雞胚保護(hù)作用的研究
　　種雞試驗(yàn)分組與飼養(yǎng)同試驗(yàn)二。收集試驗(yàn)最后7天的種蛋存放于18℃的環(huán)境中，隨后常規(guī)孵化管理。于孵化第17天時(shí)，各重復(fù)選取種蛋20枚置于另一孵化箱中，給予6小時(shí)的39.5℃高溫刺激。刺激結(jié)束，在未受刺激和高溫刺激雞胚中，各重復(fù)選取5只，解剖取樣分析。結(jié)果表明:
　　(1)同比B

14、D，SM和（或）SS降低了雞胚ROS、MDA、羰基和8-OHdG含量以及細(xì)胞凋亡指數(shù)（P＜0.05），提高了雞胚GPx、 T-SOD和CAT活力(P＜0.05)。
　　(2)在氧化應(yīng)激條件下，同比SS，SM顯著降低了雞胚ROS、MDA、羰基和8-OHdG含量及細(xì)胞凋亡指數(shù)(P＜0.05)。
　　(3)同比BD，SM和（或）SS提高了雞胚GPx1 mRNA水平和活力、TrxR1活力、SelP mRNA和蛋白水平、應(yīng)激雞胚Trx

15、R1和SPS1mRNA水平(P＜0.05)。
　　(4)在氧化應(yīng)激條件下，同比SS，SM提高了雞胚GPx1、 TrxR1和SelP mRNA水平及活力或蛋白水平(P＜0.05);上調(diào)了SPS1 mRNA表達(dá)量(P＜0.05)。
　　上述結(jié)果提示:母源硒提高雞胚存活率的機(jī)制是:通過調(diào)控抗氧化硒蛋白的基因表達(dá)而增強(qiáng)抗氧化功能，降低雞胚ROS水平，減緩氧化損傷及細(xì)胞凋亡，進(jìn)而降低雞胚死亡率;在氧化應(yīng)激條件下，SM的作用效果顯著優(yōu)于