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文檔簡介
1、稻瘟病是水稻(Oryza sativaL.)三種最常見的病害之一,由稻瘟病菌(Magnaporthe Grisea)侵染引起,在全世界范圍內(nèi)每年大約造成15%的水稻產(chǎn)量損失。根據(jù)基因--基因的作用原理,稻瘟菌與水稻跨物種間的蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)互作可能在稻瘟菌侵染水稻的過程中發(fā)揮重要作用。本文首先構(gòu)建一個跨物種間蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)的互作數(shù)據(jù)庫,然后應(yīng)用同源關(guān)系、互作結(jié)構(gòu)域和蛋白質(zhì)功能的策略建立水稻-稻瘟菌的跨物種蛋白質(zhì)互作網(wǎng)絡(luò),最后分析了在互作網(wǎng)
2、絡(luò)中稻瘟病蛋白質(zhì)對水稻各個代謝途徑的影響機(jī)制,主要研究結(jié)果如下。
1.水稻-稻瘟菌間蛋白質(zhì)互作對的預(yù)測。利用 Interolog、Domain-Domain、參與互作稻瘟病蛋白質(zhì)的類型三個角度預(yù)測水稻-稻瘟菌間蛋白質(zhì)的互作,建立了水稻-稻瘟菌間蛋白質(zhì)的互作網(wǎng)絡(luò)。該網(wǎng)絡(luò)包含27個稻瘟菌蛋白質(zhì)和236個水稻蛋白質(zhì),它們之間產(chǎn)生523個的互作對。其中來自稻瘟菌的蛋白質(zhì)在該互作網(wǎng)絡(luò)中的平均連接度為19.37,高于來自水稻的蛋白質(zhì)的連接
3、度(2.22)。表明來自稻瘟菌的蛋白質(zhì)在水稻-稻瘟菌間蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)互作網(wǎng)絡(luò)中起重要作用。
2.水稻-稻瘟菌間蛋白質(zhì)互作網(wǎng)絡(luò)的評估。通過構(gòu)建隨機(jī)互作網(wǎng)絡(luò)及支持向量機(jī)(SVM)分類策略,對上述獲得的水稻-稻瘟菌間蛋白質(zhì)互作網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行評價。結(jié)果表明與1000個隨機(jī)互作網(wǎng)絡(luò)相比,上述構(gòu)建的水稻-稻瘟菌間蛋白質(zhì)互作網(wǎng)絡(luò)顯著富集了稻瘟菌的致病基因,其P值<0.0001。用SVM分類器對互作網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行試分類,在十乘交叉驗證時,分類的準(zhǔn)確率達(dá)到
4、93.85%,獨立測試驗證時的分類準(zhǔn)確率達(dá)到84.67%。表明上述構(gòu)建的水稻-稻瘟病菌間蛋白質(zhì)互作網(wǎng)絡(luò)能準(zhǔn)確描述稻瘟菌的侵染機(jī)制。
3.水稻-稻瘟菌間蛋白質(zhì)互作網(wǎng)絡(luò)的GO分析。對上述驗證獲得的水稻-稻瘟菌間蛋白質(zhì)的互作網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行功能分割,獲得228個大小不一的互作模塊,其中最大的互作主要模塊有3684個節(jié)點。GO功能注釋分析表明這些模塊參與不同的代謝過程,其中在稻瘟菌蛋白質(zhì)的互作因子中,有10個水稻蛋白質(zhì)在水稻多個代謝途徑中起到
5、節(jié)點作用。
4.水稻-稻瘟病菌蛋白質(zhì)互作網(wǎng)絡(luò)的功能分析。下載三種病原,包括稻瘟菌、條紋病毒和清枯菌,侵染下水稻葉片的基因表達(dá)芯片數(shù)據(jù),分析上述獲得的調(diào)控模塊在不同病原侵染下的作用機(jī)制。結(jié)果表明在三種不同病原侵染過程中共同的主調(diào)控因子有150個,其中泛素蛋白質(zhì)酶途徑(Ubiquitin proteasome pathway)在三種侵染狀態(tài)下的水稻中都得到了富集,細(xì)胞凋亡信號途徑( Apoptosis signaling path
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