白樺抗蟲基因遺傳轉(zhuǎn)化研究及轉(zhuǎn)基因植株的抗蟲性.pdf

1、應(yīng)用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法向白樺（Betula platyphylla Suk）.基因組中導(dǎo)入抗蟲基因（蜘蛛殺蟲肽與Bt基因C肽序列連接在一起表達(dá)的一種融合蛋白基因）,并首次獲得抗蟲轉(zhuǎn)基因植株.為白樺的遺傳改良與高新技術(shù)育種開辟了一條新途徑,也為其他林木樹種的遺傳改良提供了理論依據(jù).利用雙元載體的根癌農(nóng)桿菌LBA4404菌株（Agrobacterium tumefaciens),含質(zhì)粒pYHY（目的基因及nptII、gus基因）對(duì)白樺試管苗莖段,

2、葉柄,葉片三種外植體進(jìn)行侵染,結(jié)果表明：大葉片生長勢(shì)強(qiáng),為轉(zhuǎn)基因的最優(yōu)外植體,轉(zhuǎn)化率能夠達(dá)到22﹪.轉(zhuǎn)基因卡那霉素抗性植株中,GUS表達(dá)陽性率為43﹪,隨機(jī)抽樣的方法進(jìn)行殺蟲肽和nptII基因的PCR檢測(cè)陽性率均為100﹪.轉(zhuǎn)基因植株的殺蟲實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,轉(zhuǎn)基因植株的殺蟲率能達(dá)到30﹪以上.舞毒蛾幼蟲發(fā)育推遲,15天時(shí)處理為4齡,但對(duì)照仍為2齡,發(fā)育推遲了2個(gè)齡期;舞毒蛾生長受到抑制,對(duì)照的體重為處理的9.7倍與6.4倍,外源基因嚴(yán)重抑制