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1、西南農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文豇豆胰蛋白酶抑制劑(CpTI)基因轉(zhuǎn)化花椰菜的研究姓名:呂玲玲申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):蔬菜學(xué)指導(dǎo)教師:雷建軍宋明2003.5.1StudyonTransformationofCowpeaTrypsinInhibitorgeneintoCauliflower(BrassicaoleraceaVHFbotrytis)AbstractTherearesomeresearchesabouttransferringBtge
2、neintocau]i—flower,bucfewwerereportedabouttransferringCpTIgeneintocauli—flowerInthispaper,cotyledonsandhypocotylswereusedasexplants,bymeansofplantgeneticengineering,foreigninsect—resistancegenecanbetransferredintoplantce
3、llCopeatrypsininhibitor(CpTI)genewastransferredintocauliflowerbyagrobacterium—mediatedtransformationmethodandthetransgeniccauliflowerplantswereobtainedThemainresultsareasbelow:1Highefficiencyregenerationsystemofcauliflow
4、erThehighefficiencyregenerationsystemisthebaseofplantgenetictransformationTheexplantswerecotyledonsandhypocotylsandMSwasusedasbasicmidiumBysupplyingdifferentconcentrationof6一BA,NAA,wegottheoptimummediawhichinducedtheadve
5、ntitiousbuddifferentiationoftwocauliflowerexplantstypesTheoptimummediaisMSBA2Omg/LNAAO2mg/LBetweenthetwoexplantstypes,thehypocoty]sexpressedthehigheradventitiousbuddifferentiationcapacity2ThebestKanconcentrationusedtosel
6、ectthetransformantplantsExplantswererestrainedfromdifferentiatingwhenKanwasaddedtothemedium,moreover,somecallusturnedwhitegraduallyanddiedWhenKanconcentrationwashigherthan15mg/L,alloftheexplantsandcallusbecamedeadSothebe
7、stselectiveconcenbrationofKanis15mg/L3TransformationsystemofcauliflowerTheproceduresdescribedwerederivedfromnumerousregenerationandtransformationdesignedtotestfactorsthatmightaffectshootregeneration7restedparametersinclu
8、delengthofprecultere(2d,3d),lengthofinoculationwithagrobacterium(30—60sec,5lOmin),lengthofcocultivation(1d,2d,3d),Kancocentration(0,5,lO,15,30,50mg/[)On]Ythoseparametersproducingthebestresultaredescribedasbe]OW:Thecanlif
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