E26菌劑對葡萄懸浮細(xì)胞防衛(wèi)反應(yīng)基因pal和sts表達(dá)的影響.pdf

1、以苯丙氨酸解氨酶(PAL)和1,2-二苯乙烯合酶(STS)作為葡萄抗病性的反應(yīng)指標(biāo),對秋黑和赤霞珠兩個葡萄品種的懸浮細(xì)胞在E26菌劑主要組分處理后的PAL酶活及防衛(wèi)反應(yīng)基因pal和sts的轉(zhuǎn)錄進(jìn)行了研究,以探討E26菌劑對葡萄抗病性的誘導(dǎo)作用.試驗(yàn)中,篩選出了一種適宜的葡萄愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基和建立了一種適宜的葡萄懸浮細(xì)胞培養(yǎng)培養(yǎng)基,并在比較多種葡萄RNA提取方法的基礎(chǔ)上,優(yōu)化了Fatima Ragueh的方法.試驗(yàn)結(jié)果表明,E26發(fā)酵液

2、或代謝液處理后,PAL酶活在絕大多數(shù)時間顯著高于對照;E26菌體或培養(yǎng)基處理后,APL酶活升高不明顯,且波動較大.Northern Dot Blotting顯示,防衛(wèi)反應(yīng)基因pal在處理后的轉(zhuǎn)錄表達(dá)時間及轉(zhuǎn)錄表達(dá)量(mRNA)的變化規(guī)律同PAL酶活性的變化規(guī)律基本一致;防衛(wèi)反應(yīng)基因sts在處理后的轉(zhuǎn)錄表達(dá)時間及轉(zhuǎn)錄表達(dá)量的變化規(guī)律同防衛(wèi)反應(yīng)基因pal的變化規(guī)律密切相關(guān),二者協(xié)同表達(dá).因此,E26菌劑防治葡萄根癌病存在著誘導(dǎo)抗性的作用,且