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文檔簡介
1、該課題主要分三部分內(nèi)容.第一部分50個(gè)伊氏錐蟲克隆群體的采集:將10<'7>條伊氏錐蟲經(jīng)耳靜脈接種一只新西蘭大白兔后,每隔2天從耳靜脈采血,分離一次蟲體,并將所采蟲體進(jìn)行單蟲克隆.每只兔子在采集完10個(gè)克隆群體后,將第10個(gè)克隆群體同樣以10<'7>條/只經(jīng)耳靜脈接種給另一只新西蘭大白兔,繼續(xù)采集另外10個(gè)克隆群體,連續(xù)傳5只新西蘭大白兔,獲得50個(gè)單蟲克隆群體,所有錐蟲克隆群體置于-196℃液氮中保存.第二部分血清學(xué)檢測(cè)變異抗原型:用
2、50只新西蘭大白兔制備50個(gè)克隆抗體相應(yīng)的50個(gè)特異性抗血清,再將50個(gè)克隆群體與50個(gè)抗血清進(jìn)行間接免疫熒光試驗(yàn)(IFA)及ABC酶標(biāo)試驗(yàn)(ABC-ELI),鑒定出這50個(gè)克隆群體實(shí)際是20個(gè)變異抗原型,使名為BeTat1.1、1.2、……1.20,共中三個(gè)克隆樣體BeTat1.8、BeTat1.9、BeTat1.20幾乎與所有抗血清有陽性反應(yīng), 推斷它們?yōu)檫@一株的"代表變體".第三部分VSG的提取、抗VSG和抗VAT兔源血清"抗體庫
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