離子束介導(dǎo)海藻糖合成酶基因轉(zhuǎn)入小麥的抗旱性研究.pdf

1、根據(jù)小麥生產(chǎn)的發(fā)展現(xiàn)狀和低能離子束介導(dǎo)轉(zhuǎn)基因的原理以及海藻糖這一在自然界廣泛存在的非還原性雙糖在提高植物抗逆性方面的研究進(jìn)展,以海藻糖-6-磷酸合成酶基因?yàn)榛A(chǔ),以提高小麥抗旱性為目的進(jìn)行了相關(guān)的研究.在試驗(yàn)中首先構(gòu)建了海藻糖-6-磷酸合成酶基因(tps1基因)的植物表達(dá)載體,經(jīng)酶切和PCR驗(yàn)證,確認(rèn)tps1基因已構(gòu)建到質(zhì)粒Pcambia1303上.在建立了適合于品種為豫麥52的小麥成熟胚愈傷誘導(dǎo)和分化的組織培養(yǎng)體系和潮霉素抗性篩選體系

2、后,借助低能離子束介導(dǎo)技術(shù)進(jìn)行了遺傳轉(zhuǎn)化,即將帶有tps1基因的植物表達(dá)載體導(dǎo)入小麥成熟胚,經(jīng)過愈傷抗性篩選過程獲得了一批再生植株.PCR檢測結(jié)果顯示有10株再生小麥呈陽性.在選擇不同離子注入劑量和不同浸泡DNA時(shí)間的條件下,得到了不同的轉(zhuǎn)化率,其中在注入劑量為1×10<'17>Ar<'+>/cm<'2>,浸泡時(shí)間為20h時(shí),轉(zhuǎn)化率達(dá)到最高值(1.20﹪).在對再生小麥進(jìn)行的抗旱性實(shí)驗(yàn)中,觀察到轉(zhuǎn)基因小麥?zhǔn)芨珊得{迫的影響明顯小于對照小麥