30242.非洲爪蟾眼發(fā)育和晶狀體再生過程中pax6基因表達熒光定量pcr和免疫組化分析

1、蘭州大學研究生學位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：本人所呈交的學位論文，是在導師的指導下獨立進行研究所取得的成果。學位論文中凡引用他人已經(jīng)發(fā)表或未發(fā)表的成果、數(shù)據(jù)、觀點等，均已明確注明出處。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的科研成果。對本文的研究成果做出重要貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明。本聲明的法律責任由本人承擔。論文作者簽名：皋到盜日期：竺：工：三：竺工’蘭州大學研究生學位論文中文摘要以無

2、尾兩棲類(Anuran)非洲爪蟾(XenopusLaevis)胚胎及后肢芽期為實驗材料，采用實時熒光定量PCR(RealTimePCRl法，SP免疫組織化分別測定非洲爪蟾胚胎期眼睛發(fā)育過程中及后肢芽期蝌蚪晶狀體再生過Pax6的表達。免疫組化結(jié)果顯示：非洲爪蟾蝌蚪晶狀體再生來源于外角膜層細胞；與對照組相比，晶狀體再生過程中Pax6蛋白在眼睛、角膜及晶狀的表達有明顯的變化：隨著晶狀體再生，外角膜Pax6蛋白表達由高到低，趨于穩(wěn)定；隨著晶狀體

3、再生，晶狀體內(nèi)Pax6蛋白由整個晶狀體表達，最后狀體上皮表達Pax6蛋白；Pax6蛋白表達免疫組化光密度分析結(jié)果顯示，體摘除后第1天，Pax6蛋白在外角膜中的表達量即顯著升高，Pax6蛋白累密度與對照組相比達到極顯著水平(PO01)；在晶狀體再生過程中Pax6蛋白存在兩個明顯的表達高峰，晶狀體再生第3天、7天。Pax6蛋白累積光密度測量結(jié)果顯示，晶狀體再生第3天累積光密度值是Pax6在眼睛內(nèi)表達的第一個高峰，與再生第1天、5天相比，達到

4、顯著水平(001P005)；再生第7天眼睛內(nèi)Pax6蛋白表達累積光密度值是Pax6在眼睛內(nèi)表達的第二個高峰，與再生第5天、9天相比，達到顯著水平(001P005)。熒光定量PCR結(jié)果顯示：在非洲爪蟾眼睛發(fā)育及晶狀體再生過程中Pax6基因mRNA分別存在兩個明顯的表達高峰，它們是胚胎20期、34期，晶狀體再生第3天、7天。以上研究結(jié)果表明，Pax6基因在非洲爪蟾眼睛發(fā)育和晶狀體再生過程中發(fā)揮晶狀體誘導、調(diào)控細胞增殖和晶狀體纖維分化的作用；