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1、南京農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文母豬蛋白限制及糖皮質(zhì)激素預(yù)處理對(duì)豬腎上腺皮質(zhì)醇分泌能力的影響及機(jī)制探討姓名:吳展望申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):基礎(chǔ)獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師:趙如茜20090601吳展望母豬蛋白限制及糖皮質(zhì)激素預(yù)處理對(duì)豬腎上腺皮質(zhì)醇分泌能力的影響及機(jī)制探討本實(shí)驗(yàn)以體外培養(yǎng)的原代豬。凈上腺皮質(zhì)細(xì)胞為模型,用糖皮質(zhì)激素(皮質(zhì)醇,地塞米松)預(yù)處理細(xì)胞48小時(shí)后,檢測(cè)細(xì)胞在基礎(chǔ)和應(yīng)激狀態(tài)下(ACTH刺激24小時(shí))腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞分泌皮質(zhì)醇的能力試驗(yàn)分為六
2、組:(1)空白預(yù)處理基礎(chǔ)分泌組:(2)空白預(yù)處理ACTH刺激組;(3)皮質(zhì)醇預(yù)處理堪礎(chǔ)分泌組;(4)皮質(zhì)醇預(yù)處理ACTH刺激組;(5)地塞米松預(yù)處理砌分泌組;(6)地塞米松預(yù)處理ACTH刺激組處理結(jié)束后收集培養(yǎng)液并提取細(xì)胞蛋白,放射免疫法測(cè)定各組細(xì)胞培養(yǎng)液的皮質(zhì)醇水平,并用westernblotting方法分析各組細(xì)胞中類固醇合成酶的表達(dá)差異結(jié)果顯示,糖皮質(zhì)激素預(yù)處理對(duì)細(xì)胞基礎(chǔ)狀態(tài)下皮質(zhì)醇的分泌沒(méi)有明顯影響,但顯著提高應(yīng)激狀態(tài)下(ACT
3、H刺激)皮質(zhì)醇水平Westernblotting結(jié)果表明,糖皮質(zhì)激素預(yù)處理顯著增強(qiáng)’g上腺皮質(zhì)細(xì)胞中類固醇合成關(guān)鍵因子StAR、P450scc以及黑皮素受體一2(Melanocortintype2receptor,MC2R)蛋白的表達(dá),同時(shí)伴隨GR蛋白水平顯著上調(diào)。以上結(jié)果表明糖皮質(zhì)激素預(yù)處理可以通過(guò)上調(diào)GR和類固醇合成關(guān)鍵因子的蛋白表達(dá)而增強(qiáng)豬’腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞在ACTH刺激下分泌皮質(zhì)醇的能力關(guān)鍵詞:梅山豬;腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞;皮質(zhì)醇;糖皮
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