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1、江南大學(xué)碩士學(xué)位論文Trametessp.SYBCL3固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)漆酶及其分離純化和特性的研究姓名:王欣申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專(zhuān)業(yè):生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師:廖祥儒20090801AbstractAbstractLaccase(EC11032),atypeofpolyphenoloxidases,cancombineanumberofcopperionsItcanoxidizeawiderangeofsubstrates,suchaspo
2、lyphenols,carboxylicacids,biologicalpigmentsandseveralaromaticcompoundsItalsohastheabilitytodegradeligninThestudyonlaccasehasacertaindegreeoftheoreticalandpracticalsignificanceLaccaseproducedbyTrametesspSYBC—L3wasstudied
3、undersolidstatefermentationwithdifferentmedialandfermentingconditionsMoreoverthepurification,characterizationanddecolorizingroleinseveraldyesoflaccasewerealsoinvestigatednleresultswereasfollows:(1)Theoptimalsolidstatefer
4、mentationmediumwassoybcanmealandsawdustwitharatioof1:l,maltose15∥L,NaN03071mol/L,CU203g/L,initialmediummoisture65%Theoptimizedloadedsampleonsolid—statefermentationconditionwas40gsolidstatemediumin250mLflask,30℃,incubated
5、for10dindarkThelaccaseactivityreached9106U/gdrysubstratewithabout878foldsoftheoriginalfermentinglevel(1037U/gdrysubstrate)(2)ThelaccaseproducedbystrainTrametesspSYBC—L3waspurifiedvia(NH4)2S04fractionation,DEAEcellulose52
6、ionexchangechromatography,andgelfiltrationwithSephadexG一100columnItspurityandyieldwere1958foldsand1854%ofthecrudeextract,respectivelyThemolecularmassofthepurifiedlaccase(Lac—T)wasabout587kDaonSDSPAGEgelTheKmofLac—TWas132
7、mmol/LitsV瑚xwas174276U/mgprotein(3)Theoptimalcatalytictemperatureoflaccase(LacT)was65“C,theoptimalpHwas35Lac—TwasstableunderdifferentpHandwithrelativeactivityofabout80%atthepHrangebetween40and90,whichindicatedthatitadapt
8、edtoawiderangeofpHLac—Tcouldbeactivatedbys04厶,M孑andCu2,andinhibitedbyC032’andK,moresignificantinhibitedbyFe2NO弘,CI’,P04j。,Na十didn’taffecttheactivityofLacTinacertainextend(4)ThelaccaseproducedbyTrametesspSYBC—L3coulddegra
9、detextiledyesEightyeightpercentofdecolorizationWasachievedwithlaccasetreatmentonMordantRed5G,76%onWeakAcidBlue25and75%onAcidBlue129for40min,respectivelywhichindicatingmatthe1accasehadthepotentialabilityfordecolorizationK
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