棉花GhRGP1,GhRGP2,GhUPTG1和GhUPTG2基因克隆和表達(dá)分析.pdf

1、棉花纖維細(xì)胞發(fā)育過程涉及大量的由單糖聚合成多糖的糖苷轉(zhuǎn)移反應(yīng).在植物體中已發(fā)現(xiàn)了大量的糖苷轉(zhuǎn)移酶基因,這與植物體中存在著多種多樣的涉及糖苷轉(zhuǎn)移的生化反應(yīng)相一致.CesA,Csl,RGP,UPTG等都屬于糖苷轉(zhuǎn)移酶類,在纖維細(xì)胞的發(fā)育中起重要作用.分離,鑒定這些基因的功能并弄清楚它們的表達(dá)調(diào)控,具有重要的意義.GhRGP1,GhRGP2,GhUPTG1,GhUPTG2基因是該實(shí)驗(yàn)室從棉花cDNA文庫中篩選出來的,可能與棉纖維發(fā)育相關(guān)的四個(gè)

2、基因.GhRGP1,GhRGP2含有1080bp讀碼框(ORF),編碼一個(gè)359aa的蛋白質(zhì).GhUPTG1和GhUPTG2分別含有1335bp和1374bp的讀碼框,編碼一443aa和457aa的蛋白質(zhì).該試驗(yàn)從以下三個(gè)方面來研究這四個(gè)基因.1.序列分析序列同源性分析結(jié)果表明,GhRGP的氨基酸序列與許多植物RGP蛋白的同源性在79％以上,如與水稻、小麥、豌豆、豇豆、擬南芥、玉米和馬鈴薯的RGP蛋白的同源性分別高達(dá)90％、87％、90

3、％、86％、88％、87％和89％,推測GhRGP1,GhRGP2基因?qū)儆赗GP蛋白基因.2.基因表達(dá)分析提取棉花發(fā)育早期各組織的RNA,利用RT-PCR的方法對四個(gè)基因的表達(dá)進(jìn)行分析.GhRGP1基因在四個(gè)組織呈低水平表達(dá),子葉中表達(dá)量稍高;GhRGP2基因在子葉、下胚軸和根中的表達(dá)量較高,在葉中不表達(dá);GhUPTG1基因在四個(gè)組織中都不表達(dá);而GhUPTG2基因只在葉中表達(dá),在其它三個(gè)組織中不表達(dá).該試驗(yàn)初步表明,此四個(gè)基因在棉花的