常見蝦蟹血細(xì)胞染色觀察及分類研究.pdf

1、　　疾病是目前制約蝦蟹養(yǎng)殖發(fā)展的關(guān)鍵因素。要從根本上解決蝦蟹疾病危害,必須對(duì)蝦蟹的免疫機(jī)制進(jìn)行深入研究。蝦蟹不具有特異性的免疫系統(tǒng),其非特異性免疫機(jī)制主要通過血細(xì)胞吞噬、包囊、形成結(jié)節(jié)等來完成,血細(xì)胞在蝦蟹免疫系統(tǒng)中扮演關(guān)鍵角色,但目前對(duì)于蝦蟹血細(xì)胞的分類及其功能研究尚無定論。
　　本文通過觀察Wright’s-Giemsa混合染液對(duì)血細(xì)胞的染色效果,以細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)及胞質(zhì)顆粒的著色差別是否顯著,胞質(zhì)顆粒及細(xì)胞核的著色是否鮮明,細(xì)

2、胞整體形態(tài)是否清晰這三方面作為判斷標(biāo)準(zhǔn),分別確定了適用于12種常見養(yǎng)殖蝦蟹血細(xì)胞的不同染色方案。這12種蝦蟹分別是：羅氏沼蝦、日本沼蝦、南美白對(duì)蝦、日本對(duì)蝦、斑節(jié)對(duì)蝦、刀額新對(duì)蝦、克氏原螯蝦、中華絨螯蟹、三疣梭子蟹、銹斑鱘、鋸緣青蟹、黑斑口蝦蛄。
　　使用上述染色方案對(duì)12種蝦蟹的血細(xì)胞進(jìn)行染色,光鏡下觀察血細(xì)胞的形態(tài)和染色特點(diǎn),結(jié)合電鏡下羅氏沼蝦血細(xì)胞的形態(tài)特征,確定以顆粒的大小、數(shù)量和密度,以及細(xì)胞的核質(zhì)比作為主要的分類依據(jù),

3、輔以顆粒、細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)的顏色,以及細(xì)胞大小等特征,對(duì)12種蝦蟹的血細(xì)胞進(jìn)行分類。將12種蝦蟹的血細(xì)胞分為三大類：透明細(xì)胞、半顆粒細(xì)胞和顆粒細(xì)胞。
　　在光鏡下統(tǒng)計(jì)各類血細(xì)胞在血液中所占的比例,測量血細(xì)胞大小,統(tǒng)計(jì)循環(huán)血細(xì)胞數(shù)。結(jié)果表明,12種蝦蟹的血細(xì)胞大小范圍：細(xì)胞長徑5-20um,短徑4-14μm。同種蝦蟹三類血細(xì)胞的大小：顆粒細(xì)胞>半顆粒細(xì)胞>透明細(xì)胞。12種蝦蟹的三類血細(xì)胞核質(zhì)比范圍：顆粒細(xì)胞為0.1-0.7,半顆粒細(xì)胞

4、為0.4-0.9,透明細(xì)胞為0.7-1.0。同種蝦蟹三類血細(xì)胞的核質(zhì)比：顆粒細(xì)胞<半顆粒細(xì)胞<透明細(xì)胞。
　　在12種蝦蟹的循環(huán)血細(xì)胞中,顆粒細(xì)胞占17-69%,半顆粒細(xì)胞26-76%,透明細(xì)胞4-26%。南美白對(duì)蝦、日本沼蝦和黑斑口蝦蛄的循環(huán)血細(xì)胞以顆粒細(xì)胞為主；其它9種蝦蟹以半顆粒細(xì)胞為主；在12種蝦蟹的三類血細(xì)胞中,透明細(xì)胞所占比例最小。12種蝦蟹血液中血細(xì)胞密度的范圍是0.4-2.5×10~7個(gè)/ml,比較接近。