23963.氡溫泉耐輻射嗜熱微生物的分類鑒定及其耐輻射機(jī)制的初步研究

1、DissertationSubmittedtoZhejiangGongshangUniversityforMaster’SDegreeofEngineeringCLASSIFICATION，Ⅱ)ENTIFICATIONANDTH[EMECHANISMOFRADIATIONRESISTANCE0FTHERMOPHILICBACll水IUMDJRADONHOTSPRINGSAuthor：LongYangMajor：FoodSciencean

2、dEngineeringSupervisor：ProfXin—leLiangJAN2011CollegeofFoodScienceandBiotechnologyZhejiangGongshangUniversityHangzhou，310035，PRChina浙江工商大學(xué)碩士學(xué)位論文111[1[IIIIIIIIIIIIIIIlY1862477氡溫泉耐輻射嗜熱微生物的分類鑒定及其耐輻射機(jī)制的初步研究摘要極端微生物因其獨(dú)特的生理學(xué)特征和巨

3、大的工業(yè)潛在價(jià)值，已成為微生物新資源開發(fā)的熱點(diǎn)。耐輻射嗜熱菌屬雙極微生物范疇，由于其獨(dú)特的耐輻射和嗜熱雙重特性，在農(nóng)業(yè)、環(huán)境、生物醫(yī)學(xué)、甚至國防等領(lǐng)域展現(xiàn)出巨大的應(yīng)用前景。本文利用PCRDGGE技術(shù)研究了氡溫泉微生物的群落結(jié)構(gòu)，并通過傳統(tǒng)的培養(yǎng)方法結(jié)合分子分類學(xué)對耐輻射嗜熱微生物進(jìn)行了分類鑒定，同時(shí)對一株耐輻射嗜熱菌的特性及其耐輻射機(jī)制進(jìn)行了初步的研究。論文對不同方式富集的氡溫泉水樣品中基因組DNA的提取方法進(jìn)行了探索，發(fā)現(xiàn)傳統(tǒng)的CTA

4、B法比較適合樣品中基因組DNA的提取。對細(xì)菌16SrDNAV3區(qū)PCR擴(kuò)增的引物和反應(yīng)程序進(jìn)行優(yōu)化，結(jié)果表明：(1)帶有“GC發(fā)夾”結(jié)構(gòu)的PCR產(chǎn)物在DGGE分析時(shí)能得到較好的分離效果，而不帶有“GC發(fā)夾”的PCR產(chǎn)物在DGGE膠中由于具有相似的電泳行為不能被分離；(2)降落PCR與普通PCR相比，前者的PCR產(chǎn)物在數(shù)量和特異性方面都較后者好。利用DGGE垂直膠確定了細(xì)菌DGGE水平電泳的最佳變性梯度為35％“60％。對不同方式富集(共