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1、恩諾沙星(ENR)屬于氟喹諾酮類合成抗菌劑,用于治療家畜禽感染性疾病.隨著ENR的大量使用,殘留于畜禽可食組織中的ENR及其代謝產(chǎn)物環(huán)丙沙星(CIP)引發(fā)了嚴(yán)重公共衛(wèi)生問題.為此,歐盟規(guī)定在可食性動(dòng)物組織中ENR和CIP的最高殘留限量(MRL)為30 μ g/kg.目前,已建立了包括HPLC、ELISA在內(nèi)的多種方法用于檢測(cè)動(dòng)物組織中的ENR殘留.HPLC存在樣品前處理嚴(yán)格,耗時(shí),成本高等缺點(diǎn);ELISA方法操作簡(jiǎn)單,經(jīng)濟(jì)而可行.該研究
2、旨在建立一種間接競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(Ci-ELISA)檢測(cè)雞組織中ENR殘留.通過N-羥基琥珀酰亞胺活性酯法(NHS法)將半抗原ENR分別與蛋白質(zhì)載體牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶聯(lián)成為全抗原ENR-BSA和ENR-OVA.ENR-BSA作為免疫原免疫家兔制備抗血清,ENR-OVA在ELISA中作為包被原.用方陣滴定法確定包被原(ENR-OVA)、抗血清、羊抗兔IgG-HRP的最佳工作濃度及反應(yīng)時(shí)間,而后在此基礎(chǔ)上建立C
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