肝損小鼠代謝組的GC-MS分析方法研究.pdf

1、代謝組學(xué)(Metabonomics)是一門系統(tǒng)研究代謝物在外界刺激或遺傳修飾下機體代謝應(yīng)答的變化及其隨時間變化規(guī)律的學(xué)科，旨在揭示有機體生命活動的代謝本質(zhì)，已在醫(yī)藥學(xué)、生物學(xué)等眾多領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。色譜一質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)具有卓越的分離定性能力和高靈敏度，是代謝組學(xué)研究中的主要技術(shù)手段之一。在眾多色譜．質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)中，氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)(GC—MS)發(fā)展較早，成熟度較高，且有商品化配套的標準數(shù)據(jù)庫，可對代謝物進行快速檢索和鑒定，是一種較為理想的代謝

2、組學(xué)分析技術(shù)。然而由于GC-MS不能直接分析不揮發(fā)或半揮發(fā)的物質(zhì)，其在代謝組學(xué)中的應(yīng)用研究相對較少。 本論文以肝損小鼠的肝組織勻漿和血漿為研究對象，通過化學(xué)衍生化反應(yīng)對代謝物進行修飾，建立了可用于代謝組學(xué)研究的GC-MS分析方法，主要研究內(nèi)容如下： (1)以空白小鼠肝組織勻漿和血漿為分析對象，研究建立了內(nèi)源性代謝物譜的GC-MS分析方法，并利用NIST 2002質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫對檢測到的代謝物進行快速鑒定。在綜合考察供試品制備

3、方法、衍生化條件和色譜分析條件的基礎(chǔ)上,獲取了一個峰容量大、分離效果佳的GC-MS分析條件，并對其進行了方法學(xué)驗證。研究結(jié)果表明，所建立的GC-MS方法可較好地表征生物樣本的代謝物譜特征,分析結(jié)果穩(wěn)定可靠，可望用于代謝組學(xué)研究。 (2)以四氯化碳(cch)致小鼠急性肝損傷模型為研究對象，采用GC-MS聯(lián)用技術(shù)檢測染毒小鼠肝組織勻漿和血漿中的內(nèi)源性代謝物，并用主成分分析法(PCA)對所獲得的代謝組數(shù)據(jù)進行模式識別。研究結(jié)果顯示，隨