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1、分類號』UDC5792密級編丐一—4252—04711中國科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院植物生理生態(tài)研究所博士后研究工作報告結(jié)核分枝桿菌rnazG功能及毒力研究工作完成時間呈Q垡生墨月報告提交時間至Q】墨璽墨且摘要我們通過比較基因組研究發(fā)現(xiàn)了Mycobacteriumtuberculosis(Mt)無毒株H37RaMazG的A219E突變。MazG屬于dNTP焦磷酸水解酶蛋白家族,能夠?qū)NTP類物質(zhì)水解為dNMP和焦磷酸。前期研究發(fā)現(xiàn)MtM
2、azG不但能夠水解正常的(d)NTP,還有降解具有致突變作用的dUTP和8oxo—dGTP的能力,而MazG[A219E]則喪失了該水解能力,為一個功能喪失突變體。MazG被敲除Myeobacteriumsmegmatis(Ms)菌株在雙氧水處理下的存活能力比野生株顯著下降。我們認(rèn)為MazG蛋白能夠降解特定的氧化損傷型dNTP從而防止其摻入DNA導(dǎo)致錯配和突變的發(fā)生。研究發(fā)現(xiàn),mazG缺失的Ms在氧化條件和穩(wěn)定生長期下的抗利福平白發(fā)突變
3、頻率明顯高于野生菌株;通過對抗性菌株rpoB基因的測序發(fā)現(xiàn),mazG缺失菌株的CT突變頻率明顯高于野生菌株,提示MazG的真正底物應(yīng)該能夠?qū)е翪T突變的發(fā)生,如5OHdCTP和5CHOdUTP等。我們對這些氧化型dNTP進(jìn)行了酶促動力學(xué)常數(shù)測定。MtMazG對5OHdCTP的‰值為19“M?;瘜W(xué)遺傳學(xué)實驗結(jié)果顯示,向mazG缺失菌株轉(zhuǎn)化5OHdCTP后其突變頻率顯著上升,同時表現(xiàn)出劑量依賴效應(yīng),而野生株突變頻率則無變化,說明5OHdCT
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