栽培黃瓜染色體倍性操作及相關(guān)基礎(chǔ)研究.pdf

1、　　以不同基因型的栽培黃瓜(CucumissativusL.)為材料，采用輻射花粉授粉技術(shù)誘導(dǎo)黃瓜單倍體，通過子房培養(yǎng)技術(shù)獲得黃瓜雙單倍體/二倍體群體，建立秋水仙素誘導(dǎo)黃瓜同源四倍體的誘導(dǎo)體系，并對二倍體“津綠四號”及其衍生出來的單倍體、四倍體黃瓜進行形態(tài)學(xué)和生理生化等方面的比較研究。 1、利用輻射花粉授粉培育黃瓜單倍體　本文首先對花藥短期保存的方式進行了研究。然后進行了輻射誘導(dǎo)單倍體的試驗。其次在分別添加0.2mg·L-1和

2、2.2mg·L-16-BA的MS培養(yǎng)基上分別進行黃瓜單倍體胚的直接成苗培養(yǎng)和器官分化培養(yǎng)。同時，以單倍體黃瓜H2為材料，比較研究花粉母細胞減數(shù)分裂的染色體行為和雌雄配子的活力。 2、通過子房培養(yǎng)獲得黃瓜雙單倍體/二倍體群體　　試驗發(fā)現(xiàn)基因型對胚的誘導(dǎo)有重要影響，雌花即將開放的子房有利于胚誘導(dǎo)。將培養(yǎng)獲得的胚狀體轉(zhuǎn)接到添加高濃度細胞分裂素的MS培養(yǎng)基上培養(yǎng)，可以觀察到胚經(jīng)過器官的直接發(fā)生和間接發(fā)生兩種方式產(chǎn)生愈傷化或體細胞胚，進

3、而發(fā)育成雙單倍體/二倍體植株。 3、黃瓜同源四倍體材料的創(chuàng)制。形態(tài)表現(xiàn)和花粉粒的形態(tài)和活力可作為鑒定四倍體的依據(jù)。 4、不同倍性黃瓜形態(tài)和一些生理生化指標的比較　　以二倍體黃瓜“津綠四號”及其衍生出來的單倍體和四倍體為材料，比較研究形態(tài)特征、葉綠素含量、過氧化物酶(POD)活性、可溶性蛋白含量和蘋果酸脫氫酶(MDH)同工酶譜帶的差異。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：葉面積、花器大小等性狀、單位面積葉綠素含量(mg·m-2)、MDH表達量等生