轉(zhuǎn)染bcl2基因?qū)π募∪毖俟嘧p傷及細胞凋亡影響的實驗研究

1、第四軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文轉(zhuǎn)染Bcl2基因?qū)π募∪毖俟嘧p傷及細胞凋亡影響的實驗研究姓名：李俊峽申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：內(nèi)科學(xué)指導(dǎo)教師：賈國良20020101第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)位論文血再灌注損傷的研究還未見報道。本研究旨在探討細胞凋亡與缺血再灌注損傷之間的關(guān)系，以明確轉(zhuǎn)染Bcl—2基因以抑制凋亡對缺血再灌注損傷的防治作用，為缺血再灌注損傷的基因治療提供依據(jù)。本研究首先通過在體大鼠缺血再灌注損傷模型，以缺口末端標記法TuNELj標i已凋亡細胞

2、，探討了大鼠心肌缺血后不同再灌注時相心嘰細胞凋亡與再灌注損傷c以血cK及心功能做為再灌注損傷的指標，之間的關(guān)系。結(jié)果顯示：心肌細胞凋亡隨心肌再灌注不同時相而變化，其中細胞凋亡指數(shù)(AI)于再灌注后2、4小時最高(24239％：20232o《)：細胞凋亡與再灌注損傷的指標(CK值)呈正相關(guān)(r=092，pO05)，與心功能(dp／dtmax)呈負相關(guān)tr=一O8l，pO05)。結(jié)論：心肌細胞凋亡因再灌注后不同時相而變化，細胞凋亡可加重缺血

3、再j藿注損傷：細胞凋亡可能通過影響心肌細胞數(shù)量及缺血再灌注損傷而與心功能有一定的關(guān)系：抑制凋亡則可能有保護心功能的作用。繼之本研究以鼠離體培養(yǎng)的心肌細胞缺血再灌注(缺氧再復(fù)氧)模型，探討了轉(zhuǎn)染抗凋亡基因BcI2對缺血再灌注損傷、細胞活力及細胞凋亡的影響，主要方法為：首先構(gòu)建含有人Bcl一2基因的逆轉(zhuǎn)錄病毒真核表達載體pDOR—sB質(zhì)粒，提取pDOR—sB質(zhì)粒，用脂質(zhì)體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)染法將pDORsB質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至心肌細胞，觀察轉(zhuǎn)染Bcl一2對