補喂綿羊瘤胃液、益生菌對28日齡羔羊胃腸道菌群及免疫的影響.pdf

1、本研究以新生羔羊為動物模型，在羔羊出生后1日齡內(nèi)補喂瘤胃液（試驗一）或益生菌（分別補喂植物乳桿菌、枯草芽孢桿菌、植物乳桿菌和枯草芽孢桿菌混合菌，試驗二），每天一次，連續(xù)14天，28日齡時屠宰收集胃腸道組織及內(nèi)容物，應(yīng)用高通量測序技術(shù)、分子技術(shù)及常規(guī)免疫技術(shù)對28日齡羔羊胃腸道菌群以及腸道黏膜免疫相關(guān)指標的測定，探討瘤胃液或益生菌對羔羊胃腸道菌群的影響，以及對羔羊機體免疫的調(diào)節(jié)。
　　試驗一結(jié)果顯示:1、與對照組相比，瘤胃液組羔羊2

2、8日齡瘤胃內(nèi)容物中厚壁菌門和放線菌門豐度值顯著降低(P＜0.05)，擬桿菌屬相對豐度值極顯著升高(P＜0.01)，乳桿菌屬相對豐度值顯著升高(P＜0.05);顯著增加了回腸內(nèi)容物雙歧桿菌屬相對豐度值(P＜0.05)，使羔羊空腸和回腸黏膜中乳桿菌屬增加，降低了擬桿菌屬、大腸桿菌屬豐度值，但差異均不顯著(P＞0.05);極顯著增加了結(jié)腸內(nèi)容物中乳桿菌屬比例(P＜0.01)。2、補喂瘤胃液提高了羔羊十二指腸中TLR2(P＜0.05)、TLR4

3、（P＜0.05）和CD14 mRNA(P＜0.01)，降低了NF-κB mRNA相對表達量(P＞0.05);使羔羊空腸中所有基因的相對表達量均低于對照組;提高回腸中TLR2(P＜0.01)、TLR4(P＜0.05)、CD14（P＞0.05）和NF-κB mRNA(P＜0.01)相對表達量。3、補喂瘤胃液提高空腸和回腸段中SIgA含量(P＜0.05)，回腸IgG含量(P＜0.05)。4、補喂瘤胃液提高羔羊十二指腸中IL-6含量(P＜0.0

4、1)，空腸中TNF-α含量(P＜0.05)，降低空腸中IL-1b含量(P＜0.01)，回腸IL-1b和IFN-γ的含量(P＜0.01)。5、補喂瘤胃液對羔羊血漿中免疫球蛋白、細胞因子、羔羊小腸內(nèi)容物中的IgG和Fc含量以及腸道絨毛長和隱窩深無顯著影響（P＞0.05）。
　　試驗二結(jié)果顯示:1、在瘤胃內(nèi)容物中，與對照組相比，混合菌組厚壁菌門相對豐度值顯著降低（P＜0.05），枯草芽孢桿菌組和混合菌組中放線菌門相對豐度值均顯著降低(P

5、＜0.05);補喂枯草芽孢桿菌降低十二指腸內(nèi)容物中擬桿菌門(P＜0.01)，增加了乳桿菌屬(P＜0.05)，降低了大腸桿菌屬(P＜0.05);空腸內(nèi)容物中，補喂植物乳桿菌增加雙歧桿菌屬(P＜0.01)，枯草芽孢桿菌增加梭菌屬豐度值(P＜0.05)，空腸黏膜中，試驗組降低了大腸桿菌(P＜0.05)、擬桿菌屬豐度值(P＜0.01)，枯草芽孢桿菌和混合菌增加梭狀桿菌屬豐度值(P＜0.05);回腸內(nèi)容物中，補喂枯草芽孢桿菌提高了糞球菌屬(P＜0

6、.01)，降低了大腸桿菌屬(P＜0.01)，混合菌提高擬桿菌門(P＜0.01)、疣微菌門(P＜0.01)、普氏菌屬(P＜0.01)、乳桿菌屬(P＜0.05)和瘤胃桿菌屬(P＜0.05)，降低了Turicibacter(P＜0.05)，回腸黏膜中，補喂枯草芽孢桿菌提高放線菌門（P＜0.05）和綠彎菌門(P＜0.05)，混合菌提高了擬桿菌門（P＜0.05）;結(jié)腸中，植物乳桿菌提高梭菌屬(P＜0.01)，枯草芽孢桿菌提高普氏菌屬（P＜0.01

7、）。2、補喂益生菌使羔羊十二指腸TLR2mRNA相對表達量分別是對照組的1.27倍(P＞0.05)、0.44倍(P＜0.01)和1.27倍(P＞0.05)，TLR4 mRNA相對表達量分別是對照組的3.41倍（P＜0.01）、0.76倍(P＞0.05)和1.34倍(P＞0.05)，CD14 mRNA相對表達量分別是對照組的4.84倍(P＜0.01)、0.83倍（P＞0.05）和2.03倍(P＜0.05)，NF-κB mRNA相對表達量分

8、別是對照組的0.54倍(P＜0.05)、0.38倍(P＜0.01)和0.40倍(P＜0.01);使羔羊空腸段TLR2 mRNA相對表達量分別是對照組的1.89倍（P＞0.05）、2.87倍(P＜0.05)和1.38倍(P＞0.05)，TLR4 mRNA相對表達量分別是對照組的1.48倍(P＞0.05)、1.56倍(P＞0.05)和4.3倍（P＜0.01），CD14 mRNA相對表達量分別是對照組的1.35倍(P＞0.05)、2.09倍(

9、P＜0.05)和3.95倍(P＜0.01)，NF-κB mRNA相對表達量分別是對照組的3.88倍(P＜0.01)、2.23倍(P＞0.05)和4.49倍(P＜0.01);在回腸段TLR2 mRNA相對表達量分別是對照組的1.04倍(P＞0.05)、2.72倍(P＜0.01)和2.34倍(P＜0.05)，TLR4 mRNA相對表達量分別是對照組的2.20倍(P＞0.05)、1.98倍(P＞0.05)和2.38倍(P＞0.05)，CD14

10、 mRNA相對表達量分別是對照組的0.79倍(P＞0.05)、1.98倍(P＜0.05)和2.01倍(P＜0.05)，NF-κB mRNA相對表達量分別是對照組的1.23倍（P＞0.05）、1.59倍(P＜0.05)和1.56倍（P＜0.05）。3、補喂枯草芽孢桿菌和混合菌使羔羊十二指腸中SIgA含量顯著降低(P＜0.05);空腸中，補喂植物乳桿菌SIgA含量極顯著高于混合菌組和對照組(P＜0.01)，補喂混合菌降低IgA含量(P＜0.

11、05)，升高IgG含量(P＜0.05);回腸中，試驗組與對照組IgA、SIgA和IgG未有顯著變化（P＞0.05）。4、補喂植物乳桿菌提高十二指腸段IL-6含量(P＜0.01)，降低TNF-α含量(P＜0.05)，補喂枯草芽孢桿菌和混合菌提高空腸IL-6和TNF-α含量(P＜0.01)，提高回腸TNF-α含量(P＜0.01)。5、補喂益生菌對羔羊血漿中免疫球蛋白含量影響不大，對7、14日齡血漿中細胞因子影響較大。6、補喂益生菌對羔羊小腸