低溫誘發(fā)肉雞腹水綜合征患雞鈣信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及心肌重塑的機(jī)制研究.pdf

1、肺動(dòng)脈高壓和右心肥大衰竭是肉雞腹水綜合征發(fā)生發(fā)展的兩個(gè)主要環(huán)節(jié)。醫(yī)學(xué)研究表明鈣信號(hào)系統(tǒng)在哺乳動(dòng)物原發(fā)性肺動(dòng)脈高壓和心臟功能衰竭過程中起著重要的作用。而心肌細(xì)胞增殖和原癌基因的表達(dá)則是心臟肥大和功能性衰竭的前提。目前，在肉雞AS研究表明鈣信號(hào)系統(tǒng)和癌基因表達(dá)可能參與了肉雞AS的形成過程。為了進(jìn)一步探討鈣信號(hào)系統(tǒng)在肉雞AS發(fā)生發(fā)展過程中的作用以及右心肥大和衰竭的發(fā)病機(jī)制，本實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了以下幾方面研究，結(jié)果如下： 1.環(huán)境低溫可誘發(fā)肉雞

2、右心肥大衰竭，而鈣離子在調(diào)節(jié)心肌功能和多種生理進(jìn)程中起著重要作用。與低溫組肉雞相比，維拉帕米組肉雞AHI在29、36、43和50日齡時(shí)顯著或極顯著降低(P＜0.05；P＜0.01)；RVSP和RVDP在36、43日齡時(shí)顯著或極顯著降低(P＜0.05；P＜0.01)；RV±dp/dtmax在43日齡時(shí)極顯著增高(P＜0.01)。結(jié)果表明維拉帕米可顯著降低肉雞腹水和右心肥大的發(fā)生，有效的維護(hù)了右心功能。 2.肺動(dòng)脈收縮和重塑在肉雞A

3、S發(fā)生過程中起著重要作用。本實(shí)驗(yàn)經(jīng)采用右心導(dǎo)管法研究發(fā)現(xiàn)AS患雞PASP、PADP和mPAP極顯著高于對(duì)照組(P＜0.01)。同時(shí)，采用焦銻酸鉀沉淀法、電鏡酶細(xì)胞化學(xué)法研究AS患雞肺臟組織Ca2+和Ca2+-ATPase活性變化，發(fā)現(xiàn)AS患雞肺臟組織中鈣沉積量顯著增多，且Ca2+-ATPase的電子密度顆粒顯著減少或缺失。表明AS患雞具有明顯的肺動(dòng)脈高壓，其可能與肺臟組織，特別是肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞鈣處理能力異常導(dǎo)致的鈣離子濃度升高和肌漿網(wǎng)

4、Ca2+-ATPase酶活性降低有關(guān)。 3.紅細(xì)胞變形性下降使其通過肺臟血管時(shí)阻力增加是導(dǎo)致AS患雞肺動(dòng)脈高壓的重要因素。本實(shí)驗(yàn)利用焦銻酸鉀沉淀法和電鏡酶組織化學(xué)定位方法，研究AS患雞發(fā)病過程中紅細(xì)胞Ca2+及Ca2+-ATPase的活性變化，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：AS患雞紅細(xì)胞胞漿發(fā)生了明顯的鈣沉積，并且Ca2+-ATPase的電子密度顆粒明顯減少。揭示AS患雞紅細(xì)胞Ca2+紊亂可能是導(dǎo)致紅細(xì)胞變形性下降的原因之一。 4.右心肥大

5、衰竭是AS患雞發(fā)病的重要環(huán)節(jié)之一，而心肌細(xì)胞內(nèi)Ca2+在調(diào)節(jié)心臟收縮和舒張功能及其生長(zhǎng)方面起著重要作用。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用右心導(dǎo)管法測(cè)定AS患雞右心壓力變化情況，采用焦銻酸鉀沉淀法、電鏡酶細(xì)胞化學(xué)法研究AS患雞右心組織Ca2+和Ca2+-ATPase活性變化。結(jié)果顯示AS患雞右心室舒張壓極顯著高于對(duì)照組(P＜0.01)，同時(shí)，右心室±dp/dtmax也極顯著降低(P＜0.01)；AS患雞右心組織發(fā)生了明顯的鈣沉積，且Ca2+-ATPase的電子

6、密度顆粒顯著減少或缺失。本研究揭示AS患雞具有明顯的右心舒張功能障礙，Ca2+濃度增高和Ca2+-ATPase功能抑制可能在其中起著重要作用。 5.本研究觀察了低溫誘發(fā)AS過程中肉雞右心組織PCNA表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化，及其維拉帕米對(duì)其的影響。結(jié)果顯示：在29、36、43和50日齡時(shí)，與對(duì)照組肉雞相比，低溫組肉雞右心室心肌細(xì)胞增殖指數(shù)和成纖維細(xì)胞增殖指數(shù)極顯著增高(P＜0.01)；與低溫組肉雞相比，維拉帕米組肉雞右心室心肌細(xì)胞和成纖維

7、細(xì)胞增殖指數(shù)顯著或極顯著降低(P＜0.05；P＜0.01)。結(jié)果表明環(huán)境低溫可在一定程度上促進(jìn)肉雞右心室心肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞增殖。維拉帕米可抑制心肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞過度增殖，有效防止了右心肥大的發(fā)生。 6.本研究通過免疫組化和原位雜交技術(shù)初步探討c-fos和c-jun在AS肉雞右心肥大和衰竭過程中的變化及維拉帕米對(duì)其表達(dá)的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：在22、29、36、43和50日齡時(shí)，與對(duì)照組肉雞相比，低溫組肉雞右心室心肌細(xì)胞c-fos/

8、c-jun蛋白和mRNA的平均光密度值顯著或極顯著升高(P＜0.05；P＜0.01)，其mRNA的陽(yáng)性面積百分比也極顯著升高(P＜0.01)；與低溫組肉雞相比，維拉帕米組肉雞右心室心肌細(xì)胞c-fos/c-jun蛋白和mRNA的平均光密度值顯著或極顯著降低(P＜0.05；P＜0.01)，其mRNA的陽(yáng)性面積百分比也極顯著降低(P＜0.01)。結(jié)果表明c-fos和c-jun癌基因在右心肥大和衰竭中起著重要作用。維拉帕米可有效抑制c-fos和