姜黃素對高糖培養(yǎng)的系膜細(xì)胞增殖和纖維連接蛋白表達(dá)的作用.pdf

1、第一部分姜黃素對高糖誘導(dǎo)的系膜細(xì)胞增殖的作用 目的：探討姜黃素(curcumin)對高糖培養(yǎng)的系膜細(xì)胞增殖的作用。 方法：以大鼠系膜細(xì)胞(Ratmesangialcell,RMC)為受試對象，將系膜細(xì)胞分為7組：①正常對照組NG(5mmol·L-1，D-葡萄糖)，②高糖組HG(30mmol·L-1，D-葡萄糖)，③HG+6.25μmol·L-1姜黃素組，④HG+12.5μmol·L-1姜黃素組，⑤HG+25μmol·L-

2、1姜黃素組，⑥HG+50μmol·L-1姜黃素組，⑦HG+100μmol·L-1姜黃素組。刺激24小時，倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)，臺盼藍(lán)染色確定細(xì)胞活性，噻唑藍(lán)(MTT)比色法檢測細(xì)胞增殖情況。 結(jié)果：作用24h后，高糖組系膜細(xì)胞增殖活性明顯增強(qiáng)，較正常組相比差異具有顯著性(P＜0.05)，增殖率為27.0％。6.25μmol·L-1姜黃素至100μmol·L-1姜黃素均能抑制高糖誘導(dǎo)的細(xì)胞增殖，24h的抑制率分別為28.6％、

3、32.5％、38.6％、45.0％、53.6％，差異具有顯著性(P＜0.05)。倒置顯微鏡下見姜黃素組細(xì)胞形態(tài)并無改變。臺盼藍(lán)染色，各組活細(xì)胞數(shù)均大于95％。 結(jié)論：姜黃素能抑制高糖誘導(dǎo)的系膜細(xì)胞增殖，并且隨著姜黃素濃度的增大，這種作用逐漸增強(qiáng)。提示姜黃素可通過抑制系膜細(xì)胞增殖活化，減少細(xì)胞外基質(zhì)(extracellularmatrix,ECM)和炎性介質(zhì)釋放，從而阻止糖尿病腎病(diabeticnephropathy,DN)腎

4、小球硬化的發(fā)生發(fā)展。 第二部分姜黃素對高糖誘導(dǎo)的系膜細(xì)胞內(nèi)纖維連接蛋白表達(dá)的影響 目的：研究姜黃素對高糖誘導(dǎo)的系膜細(xì)胞內(nèi)纖維連接蛋白(fibronection,FN)表達(dá)的影響。 方法：以大鼠系膜細(xì)胞(RMC)為受試對象，將系膜細(xì)胞分為7組：①正常對照組NG(5mmol·L-1，D-葡萄糖)，②高糖組HG(30mmol·L-1，D-葡萄糖)，③HG+6.25μmol·L-1姜黃素組，④HG+12.5μmol·L-

5、1姜黃素組，⑤HG+25μmol·L-1姜黃素組，⑥HG+50μmol·L-1姜黃素組，⑦HG+100μmol·L-1姜黃素組。刺激24h后，用Westernblot法測定細(xì)胞內(nèi)纖維連接蛋白蛋白表達(dá)水平。 結(jié)果：正常組系膜細(xì)胞內(nèi)纖維連接蛋白蛋白僅有微弱表達(dá)。高糖組細(xì)胞內(nèi)纖維連接蛋白表達(dá)明顯上調(diào)，較正常組相比差異具有顯著性(5956±91vs5157±89，P＜0.05)。與高糖組相比，6.25μmol·L-1姜黃素組至100μm

6、ol·L-1姜黃素組細(xì)胞內(nèi)纖維連接蛋白蛋白表達(dá)均明顯下降，差異均具有顯著性(分別為5611±106vs5956±91，5352±85vs5956±91，4641±90vs5956±91，4197±156vs5956±91，3579±149vs5956±91，P＜0.05)。 結(jié)論：姜黃素能抑制高糖誘導(dǎo)的系膜細(xì)胞內(nèi)纖維連接蛋白表達(dá)，并且隨著姜黃素濃度的增大，這種作用逐漸增強(qiáng)。提示姜黃素可能通過阻抑纖維連接蛋白表達(dá)而減少細(xì)胞外基質(zhì)積