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文檔簡介
1、10—去乙酰巴卡亭Ⅲ(10—deacetyl baccatinⅢ)是從紅豆杉屬植物(Taxus)短枝葉中分離、提取得到的一種紫杉烷二萜類化合物,是目前臨床和科學研究用紫杉醇和多烯紫杉醇化學半合成的關鍵原料,在緩解紫杉醇資源短缺問題中起著不可替代的作用。 云南紅豆杉(Taxusyunnanensis)是分布在我國的主要紅豆杉樹種,也是我國現(xiàn)有幾種紅豆杉植物中紫杉醇和10—去乙酰巴卡亭Ⅲ(10—DABⅢ)含量較高的樹種。本論文研究了
2、云南紅豆杉生長點細胞懸浮培養(yǎng)系的建立方法,細胞培養(yǎng)物中10—DABⅢ的高效液相測定方法,細胞培養(yǎng)物中提取、分離10—DABⅢ的方法,對云南紅豆杉細胞培養(yǎng)生產10—DABⅢ的培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件、培養(yǎng)基主要成分、前體和稀土誘導子進行了系統(tǒng)的研究;并探討了云南紅豆杉生長過程中不同部位10—DABⅢ含量變化情況。主要得到以下結論: 1、以云南紅豆杉生長點為外植體誘導愈傷組織,愈傷組織經過繼代培養(yǎng)、馴化,建立了性質均一、性狀穩(wěn)定的云南紅豆杉
3、細胞株。 2、建立了高效液相法測定云南紅豆杉細胞培養(yǎng)物中10—DABⅢ含量的方法,該方法操作簡便,靈敏度高,重現(xiàn)性好,專屬性強,同時該方法還可以用于紅豆杉枝葉中10—DABⅢ含量的檢測。 3、從云南紅豆杉細胞培養(yǎng)物中提取、分離得到10—DABⅢ,并用薄層層析、高效液相法、核磁共振氫譜和碳譜對結構進行了鑒定,證明從細胞培養(yǎng)物中提取、分離得到的10—DABⅢ與從天然紅豆杉植物中得到的10—DABⅢ為同一化合物。 4、
4、篩選出能夠促進10—DABⅢ合成與釋放的培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件;從B5培養(yǎng)基主要成分氯化鈣、磷酸二氫鈉、硫酸銅、硫酸銨和硝酸鉀中篩選出能夠促進10—DABⅢ合成與釋放的適宜濃度;從乙酸鈉、苯甲酸鈉兩種前體和硝酸鈰、硝酸鈰銨、硝酸鑭三種稀土誘導子中篩選出能夠促進10—DABⅢ合成與釋放的適宜濃度。 5、初步探明了云南紅豆杉生長過程中不同部位10—DABⅢ含量的變化情況,休眠芽分化期是10—DABⅢ在枝葉中合成與積累的關鍵時期。
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