兩種紅豆杉植物愈傷組織培養(yǎng)、褐化抑制及紫杉醇含量檢測.pdf

1、曼地亞紅豆杉(Taxusmedia)和南方紅豆杉(Taxuschinensisvar．marei)都是提取抗癌藥品紫杉醇的重要來源，同時(shí)也是優(yōu)秀的園林綠化樹種，其中南方紅豆杉是我國特有物種。目前，針對這兩種植物的組織培養(yǎng)研究還相對薄弱。本文選取曼地亞紅豆杉和南方紅豆杉植株，對其愈傷組織誘導(dǎo)和培養(yǎng)條件進(jìn)行研究，對組織培養(yǎng)中的褐化抑制方法進(jìn)行了探討，并對枝葉中紫杉醇含量進(jìn)行了測定和比較，提出了較為完整的曼地亞紅豆杉和南方紅豆杉愈傷組織誘導(dǎo)、

2、培養(yǎng)和褐化抑制技術(shù)體系，并以此為基礎(chǔ)，對兩種紅豆杉組織培養(yǎng)研究主要問題和前景進(jìn)行了探討和展望。 基于DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)對愈傷組織誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)框架的均勻設(shè)計(jì)，本文首先對兩種紅豆杉的愈傷組織誘導(dǎo)和培養(yǎng)進(jìn)行了研究，重點(diǎn)是對莖和葉外植體的誘導(dǎo)能力分析比較、植物生長調(diào)節(jié)劑的選取、濃度配比優(yōu)化；對兩種紅豆杉愈傷組織誘導(dǎo)能力從三個(gè)方面進(jìn)行了對比研究。結(jié)果表明：兩種紅豆杉用于愈傷組織誘導(dǎo)的最佳外植體均為莖；B5+NAA2．9mg／L+6-BA0．3

3、mg／L最適合曼地亞紅豆杉愈傷組織誘導(dǎo)和培養(yǎng)，B5+NAA1．7mg／L+6-BAO．1mg／L最適合南方紅豆杉愈傷組織誘導(dǎo)和培養(yǎng)；南方紅豆杉外植體成愈時(shí)間較曼地亞紅豆杉小、愈傷組織直徑較曼地亞紅豆杉大，曼地亞紅豆杉愈傷組織誘導(dǎo)率較南方紅豆杉高，整體來看，南方紅豆杉更易于進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)和培養(yǎng)。 其次，本文對利用植物材料避光處理、向培養(yǎng)基中添加活性炭、抗壞血酸以及上述方法復(fù)合使用抑制兩種紅豆杉愈傷組織培養(yǎng)不同階段中產(chǎn)生的褐化現(xiàn)象

4、進(jìn)行了探討。結(jié)果表明：在愈傷組織誘導(dǎo)階段，植物材料避光處理、向培養(yǎng)基中添加活性炭和抗壞血酸都能對愈傷組織褐化起到不同程度的抑制作用，而添加抗壞血酸0.1g／L時(shí)對兩種紅豆杉褐化抑制效果均最佳；在愈傷組織增殖階段，向培養(yǎng)基中添加抗壞血酸能有效的對褐化起到抑制作用，濃度為0．01-O.1g／L時(shí)對曼地亞紅豆杉效果最佳，濃度為0.01-0.2g／L時(shí)對南方紅豆杉效果最佳。 最后，本文對兩種紅豆杉枝葉中紫杉醇含量進(jìn)行了檢測和對比。結(jié)果表