人工調(diào)控促進南方紅豆杉中紫杉醇及相關(guān)紫杉烷增量的研究.pdf

1、本文以南方紅豆杉為植物材料，以南方紅豆杉中主要抗腫瘤活性物質(zhì)紫杉醇為研究目標(biāo)，應(yīng)用不同人工調(diào)控手段誘導(dǎo)南方紅豆杉中紫杉醇增量，以及探討誘導(dǎo)紫杉醇增量的代謝機理。
　　1、確立了同步檢測南方紅豆杉中紫杉醇及相關(guān)紫杉烷包括:10-去乙酰巴卡亭Ⅲ、10-去乙酰紫杉醇、7-木-10-去乙酰紫杉醇、三尖杉寧堿、7-表-10-去乙酰紫杉醇的檢測條件。色譜柱Curosil-PFP5μm(4.6mm×250 mm)(Phenomenex Inc.

2、USA)。使用兩種等度洗脫方式:流動相A（乙腈∶水=25∶75，0～17分鐘）、流動相B（乙腈∶水=37∶63，17～90分鐘），流速:1.0ml/min，檢測波長:227nm。結(jié)果表明，該檢測分析方法精密度高、重現(xiàn)性好、準確度高、可靠性強，適用于南方紅豆杉中紫杉醇及相關(guān)紫杉烷類化合物的檢測。
　　2、使用不同激素處理南方紅豆杉扦插，誘導(dǎo)南方紅豆杉中紫杉醇的增量，應(yīng)用紫杉醇在紅豆杉體內(nèi)的合成代謝途徑。結(jié)果表明:NAA、IBA、AB

3、T誘導(dǎo)南方紅豆杉扦插苗中紫杉醇增量不同、其代謝機理也不盡相同。其中IBA誘導(dǎo)南方紅豆杉紫杉醇出現(xiàn)負增量?？赡苁荌BA處理南方紅豆杉后，抑制10-DAB、7-xyl-10-DAT的合成，從而導(dǎo)致南方紅豆杉扦插苗中紫杉醇出現(xiàn)負增量;NAA處理南方紅豆杉后，促進7-xyl-10-DAT、7-epi-10-DAT轉(zhuǎn)化為10-DAT、taxol，增加紅豆杉體內(nèi)taxol的含量;ABT處理南方紅豆杉后，促進10-DAB的合成，進而促進南方紅豆杉中t

4、axol含量的升高。
　　3、噴施不同濃度5mg/L、10mg/L、20mg/L的赤霉素在紅豆杉上，誘導(dǎo)紅豆杉中紫杉醇增量。結(jié)果表明:赤霉素為10mg/L誘導(dǎo)南方紅豆杉中的紫杉醇含量最高，而5mg/L、20mg/L的赤霉素誘導(dǎo)南方紅豆杉中紫杉醇增量的能力均低于10mg/L赤霉素，其代謝機理可能是:低濃度的赤霉素能促進促進10-DAB轉(zhuǎn)化為taxol、7-xyl-10-DAT、7-epi-10-DAT，從而造成10-DAB含量減少，

5、taxol、7-xyl-10-DAT、7-epi-10-DAT的含量則升高。而高濃度的赤霉素則抑制cephalomanine、7-epi-10-DAT、10-DAT向紫杉醇方向轉(zhuǎn)化，而是更多的轉(zhuǎn)化為7-xyl-10-DAT。
　　4、噴施不同濃度100mg/L、300mg/L、600mg/L的水楊酸在紅豆杉上，誘導(dǎo)紅豆杉中紫杉醇增量。結(jié)果表明:不同濃度水楊酸均可以誘導(dǎo)南方紅豆杉中紫杉醇增量，但是不同濃度的水楊酸誘導(dǎo)紫杉醇增量不同，

6、水楊酸為300mg/L誘導(dǎo)南方紅豆杉中的紫杉醇增量最大。
　　5、通過營造特定的光環(huán)境來調(diào)控南方紅豆杉的生長發(fā)育及紫杉醇的合成代謝。強光脅迫和全遮蔭的環(huán)境都不利于南方紅豆杉的生長，南方紅豆杉生長發(fā)育的最佳光環(huán)境是早上和下午遮蔭，中午受強光直射。紫杉醇在南方紅豆杉體內(nèi)的含量受南方紅豆杉所受的光強增強而升高。同時南方紅豆杉中10-DAB、10-DAT、7-epi-10-DAT、Cephalomannine的含量主要受光因子調(diào)控，南方紅

7、豆杉10-DAB、10-DAT、 Cephalomannine的含量隨著總光強及各波段光強的增強而升高。但7-epi-10-DAT的含量則隨著光強的減弱而升高。另外，南方紅豆杉體內(nèi)紫杉醇、10-DAT、Cephalomannine、7-epi-10-DAT的合成主要受中午時段的光強調(diào)控，而南方紅豆杉中10-DAB的合成可能除了與中午階段的光強有關(guān)外，還受其他時間段的光強調(diào)控。人工種植南方紅豆杉，最佳的生態(tài)環(huán)境是，利用梯田的方式，營造早上