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文檔簡介
1、紫杉醇是從紅豆杉科紅豆杉屬植物中分離出的一個具有獨特作用機制的抗癌二萜類化合物,對卵巢癌、乳腺癌等癌癥具有很好的治療作用。紫杉醇的臨床需求量大,但來源少,從紅豆杉植物中提取仍然是紫杉醇的主要來源。在紅豆杉中,紫杉醇的干重僅為0.02%,而7-木糖-10-去乙酰紫杉醇(7XDT)的含量是紫杉醇的10倍以上,但都作為廢物未被利用。7XDT去掉C-7位木糖基即轉(zhuǎn)變?yōu)?0-去乙酰紫杉醇(10DT),再在其10位上經(jīng)過?;磻?yīng)即可形成紫杉醇。因此
2、,如何利用這一資源成為該研究領(lǐng)域的一個重要課題。
本研究從紅豆杉植物的枝葉及其生長的土壤、檜柏樹下腐葉覆蓋的土壤中篩選出的多種菌株復(fù)篩,并通過4-甲基傘形花內(nèi)酯-7B-D-木糖作為熒光標(biāo)記底物進(jìn)行菌種純化,結(jié)合薄層層析(TLC)、高效液相色譜技術(shù)(HPLC)、高效液相色譜紫外光譜聯(lián)用(LC-UV)等方法獲得了一個具有選擇性水解7XDT上7位木糖殘基的細(xì)菌菌株,命名為imm-21。進(jìn)一步研究了培養(yǎng)基成分、溫度、pH值、菌量和
3、底物濃度等因素對菌株imm-21轉(zhuǎn)化7XDT的影響,在優(yōu)化條件下,分析了菌株imm-21轉(zhuǎn)化7XDT的動態(tài)。結(jié)果表明:麥麩培養(yǎng)基比LB培養(yǎng)基更有利于菌株imm-21轉(zhuǎn)化7XDT;麥麩培養(yǎng)基含0.4%硫酸銨顯著提高imm-21菌株轉(zhuǎn)化7XDT的效率:在麥麩培養(yǎng)基中無論是添加燕麥木聚糖還是樺木木聚糖對轉(zhuǎn)化效率沒有明顯影響;26℃不僅適合imm-21菌株的生長,也非常適合其對7XDT的轉(zhuǎn)化;pH6.0為imm-21菌株轉(zhuǎn)化7XDT為10DT的
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