南方紅豆杉中三尖杉寧堿和7-表-10-去乙?；仙即几咝дT導(dǎo)提取純化工藝研究.pdf

1、|，》UniversityCode：10225RegisterCode：S10750DissertationfortheDegreeofMasterStudyonHigheffectiveInduction，ExtractionandPurificationofCephalomannineand7epi10DATfromTaxuschinensisvarmaireiCandidate：Supervisor：AcademicDegreeA

2、ppliedfor：Speciality：Dateof0ralExamination：University：WangYmgProfFuYujieMasterDgreePharmacognosyJune，2010NortheastForestryUniversity。。。。。。。。。：：：：：。：：，，，；。。。。，；，。。，。。。。塑塑呈。，。。。。，二UlIIIiliiIIIlil1i1iIIIIIIIIIIIIllllIIIIIII

3、IIIIIliIIIIIIIIIIli[1lll?！馳2050780。摘要本文以可再生南方紅豆杉枝葉為原料，提取、分離、純化紫杉烷類化合物一三尖杉寧堿和7表10去乙酰基紫杉醇。通過對南方紅豆杉枝葉中三尖杉寧堿和7表10一去乙?；仙即己康膭討B(tài)變化，以及紫外輻射、氧氣空化、酸和酶誘導(dǎo)對南方紅豆杉枝葉中三尖杉寧堿和7表10去乙?；仙即己孔兓挠绊?，確定了最佳采收期和酶誘導(dǎo)提取工藝，并首次通過大孔吸附樹脂柱

4、層析，正反相柱層析相結(jié)合的方法對三尖杉寧堿和7表10去乙?；仙即嫉募兓に嚄l件進行了系統(tǒng)的研究，得出如下結(jié)論：一、建立了三尖杉寧堿和7表10去乙?；仙即嫉臋z測方法并掌握了二者含量時空變化趨勢：1三尖杉寧堿和7表10去乙?；仙即嫉腎IPLC分析方法：色譜柱：CurosilPFP色譜柱5肛(250mmx46ITIIllID)，流動相：乙腈／水(42／58，v／v)，流速：1mL／min，進樣量10此，柱溫：35℃，檢測波長：234hi

5、ll。2南方紅豆杉枝葉中三尖杉寧堿和7表10去乙酰基紫杉醇含量的動態(tài)變化規(guī)律和最佳采收期：三尖杉寧堿和7表10去乙?；仙即荚谝荒曛械暮孔兓厔葺^為一致，均呈現(xiàn)先升高后降低再升高的趨勢。其中11月份時二者含量達到峰值，在葉中三尖杉寧堿和。7表10去乙?；仙即己糠謩e為00342mg／g和O0271mg／g，在莖中二者含量分別為000272mg／g和0012mrdg，因此確定11月為南方紅豆杉的最佳采收期。通過對比新老莖葉中三尖杉寧堿

6、和7表10去乙?；仙即己康淖兓?，發(fā)現(xiàn)新莖葉中二者含量約為老莖葉中的50％，說明三尖杉寧堿和7表10去乙?；仙即级茧S著莖葉的成熟而逐漸累積。二、確立并優(yōu)化了環(huán)境誘導(dǎo)提高三尖杉寧堿和7表10去乙?；仙即己康姆椒ǎ鹤罴颜T導(dǎo)方法：酶誘導(dǎo)；酶種類：纖維素酶；酶濃度：lmg／mL；酶誘導(dǎo)時間：24h；溫度：45℃。三尖杉寧堿和7表10去乙?；仙即嫉暮糠謩e達到了0027mg／g和0024mg／g，較之前未經(jīng)酶誘導(dǎo)樣品提高了5521％和5

7、213％。三、確定并優(yōu)化了酶誘導(dǎo)后三尖杉寧堿和7表10去乙?；仙即嫉奶崛」に嚕禾崛》椒ǎ贺搲嚎栈?；提取溶劑：80％乙醇溶液：總液固比：30：l；提取時間：每次45min；提取次數(shù)：3次。三尖杉寧堿和7表10去乙?；仙即嫉暮糠謩e為0024mg／g和0021mg／g。經(jīng)酶轉(zhuǎn)化后的三尖杉寧堿和7表10去乙?；仙即际章史謩e為8961％和8324％。四、富集純化得到高純度的三尖杉寧堿和7表一lO去乙酰基紫杉醇：1首次應(yīng)用大孔吸附樹脂柱層析