高三尖杉酯堿抗人乳腺癌細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究及其含量測(cè)定.pdf

1、高三尖杉酯堿系我國(guó)研制成功的高效抗腫瘤藥。該藥物能使核糖體解聚,抑制蛋白質(zhì)合成,使腫瘤細(xì)胞減少,瘤組織核酸含量下降,研究顯示高三尖杉酯堿對(duì)多種腫瘤有抑制作用,但對(duì)乳腺癌的研究尚未見(jiàn)報(bào)道,本文用體外人乳腺腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)的方法,觀察了高三尖杉酯堿對(duì)人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-453的抑制和誘導(dǎo)凋亡作用,以挖掘治療乳腺癌的新藥物。而提一克分析純的高三尖杉酯堿,需要近噸的三尖杉,一公斤該堿價(jià)值70萬(wàn)美金,經(jīng)濟(jì)價(jià)值極高。因此,本文還探討了高效毛細(xì)管電

2、泳用于檢測(cè)高三尖杉酯堿含量的新方法, 為高三尖杉脂堿類(lèi)藥物有效成分含量的鑒定提供一定的依據(jù)。 高三尖杉酯堿抗乳腺癌作用的初步研究實(shí)驗(yàn) (1)高三尖杉酯堿對(duì)人乳腺癌細(xì)胞株MDA-MB-453的生長(zhǎng)均有抑制作用,呈時(shí)間、劑量依賴(lài)關(guān)系,對(duì)MDA-MB-453細(xì)胞的IC50值為92μg/ml。 (2)臺(tái)盼藍(lán)染色檢測(cè)結(jié)果表明,高三尖杉酯堿20～80μg/ml作用于MDA-MB-453細(xì)胞24小時(shí),細(xì)胞死亡率隨藥物濃度的增大

3、而升高,而空白組活細(xì)胞率為98％,結(jié)果表明高三尖杉酯堿能夠抑制人乳腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)。 (3)MTT檢測(cè)結(jié)果表明,高三尖杉酯堿10～160μg/ml作用于MDA-MB-453細(xì)胞24-72小時(shí),細(xì)胞凋亡率隨藥物濃度的增大而升高。結(jié)果顯示高三尖杉酯堿能夠誘導(dǎo)人乳腺癌細(xì)胞死亡。 (4)高三尖杉酯堿120μg/ml作用于MDA-MB-453細(xì)胞24h采用透射電鏡觀察可以發(fā)現(xiàn)細(xì)胞出現(xiàn)凋亡的形態(tài)學(xué)變化。 毛細(xì)管電泳法測(cè)定高三尖杉

4、酯堿注射液的含量 (1)建立了高三尖杉酯堿注射液中高三尖杉酯堿含量測(cè)定的高效毛細(xì)管電泳法。磷酸二氫鈉-硼砂為電泳介質(zhì),乙醇為有機(jī)添加劑,在20kV高壓,pH 6.98,25℃的條件下檢測(cè)了高三尖杉酯堿注射液中高三尖杉酯堿含量。 (2)在最佳的試驗(yàn)條件下,藥物濃度為橫坐標(biāo)(X),峰面積為縱坐標(biāo)(Y)之間呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系,該法的線性范圍為0.005～0.080mg/L。著重探討了緩沖溶液濃度、種類(lèi)、酸堿度及溫度、其操作電壓