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1、我們分別使用硫代反義寡核苷酸(PS-ODN)、反義RNA(antisense RNA)、錘頭狀核酶(hammerhead ribozyme)三種基因工程技術(shù),對(duì)膽囊癌端粒酶活性進(jìn)行抑制作用的研究,以探討膽囊癌的基因治療問題.結(jié)論:1、膽囊癌細(xì)胞系(GBC-SD)端粒酶活性檢測(cè)陽性.2、我們首次采用的RT-PCR法調(diào)取的人膽囊癌細(xì)胞(GBC-SD)端粒酶的RNA亞基的基因序列與文獻(xiàn)報(bào)道的人端粒酶RNA基因的26-88位之間的堿基序列的編碼
2、鏈序列完全一致,其中包括模板區(qū)CUAACCCUAAC序列.保證了后續(xù)實(shí)驗(yàn)的科學(xué)性和嚴(yán)謹(jǐn)性.3、成功構(gòu)建了可轉(zhuǎn)錄反義RNA基因的真核表達(dá)載體,并經(jīng)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)化系統(tǒng)導(dǎo)入膽囊癌細(xì)胞.4、成功構(gòu)建了攜帶有切割hTR錘頭狀核酶基因的真核表達(dá)載體,并成功轉(zhuǎn)入膽囊癌細(xì)胞內(nèi).5、硫代反義寡核苷酸(PS-ODN)、反義RNA(antisense RNA)、錘頭狀核酶(hammerhead ribozyme)三種基因工程技術(shù),均對(duì)膽囊癌端粒酶活性有明顯的抑制
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