樹突狀細(xì)胞瘤苗治療大鼠顱內(nèi)膠質(zhì)瘤的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、復(fù)口大學(xué)博研究生學(xué)位論文縮略語本3憶常用縮略潤手DCDendriticcell樹突狀細(xì)胞rrGMCSFRecombinentratgranulocyte重組大鼠粒細(xì)胞巨噬macrophagecolonystimulatingfactor細(xì)胞集落刺激因子rrll.4Recombinentratinterleukin4重組大鼠白細(xì)胞介素4Antigenpresentcell抗原提呈細(xì)胞CytotoaicTlymphocyte細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)

2、胞PBMCPeripheralbloodmon命learcell外周血單個核細(xì)胞IFNYInterfcnongamma丫一「擾素IL10lnterleukin10白細(xì)胞介素10復(fù)口大學(xué)h5卜研究生學(xué)位論文中文摘絲增殖反應(yīng)ELISA法檢測血清中IL10及IFNY水平以觀察凋亡C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞致敏的樹突狀細(xì)胞瘤苗對顱內(nèi)膠質(zhì)瘤免疫治療的效果及安個性。結(jié)果:1，本研究應(yīng)用立體定向尾狀核接種C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞，所有接種大鼠均有膠質(zhì)瘤zL長(100yo)

3、，免疫組化GFAP染色陽性，證實(shí)腫瘤是膠質(zhì)細(xì)胞來源腫瘤生長速度于第三周開始明顯加快荷瘤大鼠外周血中CD8T淋巴細(xì)胞隨著腫瘤生存時(shí)間的延長明顯降低(21.93士3.81%)，與正常大鼠(27.92士1.30%)相比P=0.004，差異顯著。2.體外研究顯示我們的培養(yǎng)體系培養(yǎng)出的DC具有典型DC的“樹枝狀突起”的形態(tài)特征，細(xì)胞表面高表達(dá)CDIlcOX6(MHCI)OX62MHCII類分子等大鼠DC相對特異的表面分子，相對低表達(dá)協(xié)同刺激分子C

4、D80CD86表型特征為非充分成熟的樹突狀細(xì)胞，滿足制備腫瘤疫苗的需要而且觀察到以不同抗原處理方式制備的抗原致敏DC得到的腫瘤疫苗中，其中以凋亡腫瘤細(xì)胞抗原致敏的DC瘤苗有更強(qiáng)的刺激T細(xì)胞增殖的能力，另外在誘導(dǎo)CTL過程中分泌的淋巴細(xì)胞趨化因子以及細(xì)胞因子IFNY也明顯高于其它組、并且可以誘導(dǎo)殺傷活性更強(qiáng)的CTL.3.經(jīng)凋亡C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞致敏的樹突狀細(xì)胞免疫治療組的荷瘤大鼠生存期明顯延長，與對照組相比P=0.0026治療組外周血中CD8

5、十T淋巴細(xì)胞比例顯署高于PBS對照組，P=0.004，與未致敏DC組比較P=0.037PBS組與未致敏DC組比較P=0.75CTL分析結(jié)果顯示治療組可以誘導(dǎo)針一對膠質(zhì)瘤細(xì)胞的殺傷性免疫應(yīng)答并月.治療組大鼠循環(huán)血中IFN￥水平明顯升高，而IL10水平很低，甚至檢測小到。結(jié)論:1._立體定向尾狀核接種C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞制備大鼠膠質(zhì)瘤模型的方法，接種成功率高達(dá)100%。2.與其它方方式制備的抗原相比，以凋亡的腫瘤細(xì)胞作為抗原負(fù)載DC獲得瘤苗可獲得