小劑量維拉帕米和曲馬多對慢性神經(jīng)痛大鼠P2X-,3-受體表達的影響.pdf

1、目的：本實驗擬采用免疫組織化學(xué)方法，觀察慢性神經(jīng)痛大鼠背根神經(jīng)節(jié)P2X<,3>受體的表達，腹腔注射維拉帕米和曲馬多對慢性神經(jīng)痛大鼠鎮(zhèn)痛效應(yīng)的觀察及背根神經(jīng)節(jié)P2X<,3>受體表達的影響。 方法：54只純種清潔級成年SD大鼠，體重150～190g，．隨機分為9組：假手術(shù)組(S組，n=6)、手術(shù)組(n=48)。手術(shù)組又隨機分為8個亞組：腹腔注射生理鹽水組(NS組，n=6)、腹腔注射維拉帕米組(V5組，n=6)、腹腔注射曲馬多組(T5

2、組、T10組、T20組，各組n=6)、腹腔注射維拉帕米+曲馬多組(V5+T5組、V5+T10組、V5+T20組，各組n=6)。大鼠均于術(shù)前一天測定右后足熱痛閾值。術(shù)日腹腔注射10﹪水合氯醛(350～400mg·kg<'-1>)麻醉后，手術(shù)組構(gòu)建大鼠右側(cè)CCI模型，S組進行同樣的手術(shù)，暴露坐骨神經(jīng)但不結(jié)扎。術(shù)后第三天測定熱痛閾值確定熱痛覺過敏形成以后，分別每天腹腔注射生理鹽水、5mg·kg<'-1>維拉帕米、5rag·k<'-1>曲馬多、

3、10mg·kg<'-1>曲馬多、20mg·k<'-1>曲馬多、5mg·kg<'-1>維拉帕米+5mg·kg<'-1>曲馬多、5mg·kg<'-1>維拉帕米+10mg·kg<'-1>曲馬多、5mg·kg<'-1>維拉帕米+20mg·kg<'-1>曲馬多，所有藥物均用生理鹽水稀釋成2ml，直至術(shù)后第14天。測定D7、D10、D14右后足熱痛閾值，并于D14測試完畢后，深麻醉下固定取右側(cè)L4、L5背根神經(jīng)節(jié)，用免疫組織化學(xué)方法觀察其中P2X<

4、,3>受體的表達。 結(jié)果： 1、D0各組間熱痛閾值差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；S組在D3熱痛閾值降低，但與術(shù)前相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；T10組、T20組劑量依賴性延長大鼠熱痛閾值(P<0.05，n=18)。T5組與NS組相比，大鼠的熱痛閾值在各時點均無顯著性差異(P>0.05)，可以認為5mg·kg<'-1>為閾下劑量。 2、在熱輻射實驗中，V5組與NS組相比，大鼠的熱痛閾值在各時點均無顯著性

5、差異(P>0.05)，可以認為在該實驗中5mg·kg<'-1>維拉帕米為閾下劑量，該劑量可以增強T10組、T20組對熱輻射刺激的鎮(zhèn)痛作用(P<0.05，n=12)，但對T5組鎮(zhèn)痛作用卻沒有影響(P>0.05)。 3、免疫組織化學(xué)檢測結(jié)果(背根神經(jīng)節(jié)中P2X<,3>受體免疫反應(yīng)陽性神經(jīng)元數(shù)量)：T20組及V5+T20組背根神經(jīng)節(jié)中P2X<,3>受體免疫反應(yīng)陽性細胞數(shù)目與S組相比無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)；其余六組與S組相比統(tǒng)計學(xué)

6、差異顯著(P<0.05)；V5組、T5組及V5+T5組陽性細胞數(shù)目與Ns組相比無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)，余兩兩組之間比較均有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。 結(jié)論： 1．腹腔注射曲馬多對慢性神經(jīng)痛大鼠具有明顯的鎮(zhèn)痛效果，且在一定范圍內(nèi)與劑量相關(guān)；小劑量維拉帕米對慢性神經(jīng)痛大鼠無鎮(zhèn)痛作用，但可以增強曲馬多的鎮(zhèn)痛效果； 2．慢性神經(jīng)痛大鼠背根神經(jīng)節(jié)P2X<,3>受體表達增加，表明P2X<,3>受體在慢性神經(jīng)痛中可能發(fā)