格木中具細(xì)胞毒活性的化學(xué)成分研究;格木中微量咖薩因型酰胺和短萼儀花中化學(xué)成分的在線分析方法研究.pdf

1、格木(Erthrophleum fordii Oliver)為豆科(Leguminosae)格木屬植物，又名赤葉木、斗登鳳，是我國傳統(tǒng)草藥。生于山地密林或疏林中，分布于廣西、廣東、福建、臺灣、浙江等省區(qū)。其樹皮和種子可入藥，性味辛、平，有毒，入心經(jīng)。主要功效為益氣活血，可治療心氣不足所致的氣虛血瘀之癥，即心悸、氣短、乏力、下肢及全身浮腫等。該植物種子和莖皮有毒，中毒后產(chǎn)生強(qiáng)烈而持久的局部麻醉。非洲同屬植物E.guinense的莖皮曾用作

2、箭毒，人中毒后因呼吸抑制而死亡。藥理實驗表明：格木樹皮的乙醇提取物，及其乙酸乙酯和正丁醇萃取物具有一定的細(xì)胞毒活性。本課題組曾對其活性部位的化學(xué)成分進(jìn)行過研究，從中分離得到了黃酮、二萜苷和三萜等化合物，但是藥理實驗表明這些化合物都不具有細(xì)胞毒活性。為了尋找其活性成分，本論文作者繼續(xù)對其活性部位-乙酸乙酯和正丁醇萃取物進(jìn)行化學(xué)成分研究，從中分離得到了17個化合物，包括8個咖薩因型二萜酰胺類生物堿，1個黃烷醇，4個黃烷醇縮合鞣質(zhì)，2個三萜，

3、1個甾醇及其1個單糖苷類化合物。 從格木樹皮的乙醇提取物中分離得到的化合物，采用波譜和化學(xué)方法確定其結(jié)構(gòu)為：3β-O-巴豆?；?降erythrophlamide(1)，3β-O-乙?；?降erythrophlamide(2)，6α-羥基-降cassamide(3)，7-去氫-降erythrosuamide(4)，降erythrosuamide22-O-β-D-半乳糖苷(5)，6α-羥基-降cassamide 22-O-β-D-半

4、乳糖苷(6)，降cassamide(7)，降erythrosuamide(8)，刺槐亭醇(9)，刺槐亭醇-(4→6)-刺槐亭醇(10)，縮合鞣質(zhì)B5(11)，非瑟酮醇．(4β→6)-刺槐亭醇(12)，雙非瑟酮醇-兒茶素(13)，白樺酸(14)，乙酰莫繞酸(15)，β-谷甾醇(16)，胡蘿卜苷(17)；其中6個化合物(1-6)為新化合物，化合物7，8，10-13為首次從本種植物中分離得到的已知化合物。 本文利用MTT法對所得到的咖

5、薩因型二萜酰胺類單體化合物進(jìn)行了幾種人腫瘤細(xì)胞株的細(xì)胞毒活性測定。同時，采用WestemBlot方法考察了化合物3和7細(xì)胞毒活性的作用機(jī)理。根據(jù)已有單體化合物的UV、ESI-MS、ESI-MS<'n>、NMR等譜學(xué)數(shù)據(jù)，總結(jié)出具有類似結(jié)構(gòu)的化合物的譜學(xué)規(guī)律。通過對提取物組分中微量成分進(jìn)行在線檢測，將在線實驗得到的數(shù)據(jù)與總結(jié)出的規(guī)律進(jìn)行比較分析，期望推測出組分中微量成分的結(jié)構(gòu)?；谏鲜龅难芯克悸?，對從格木樹皮中分離得到的8個咖薩因類二萜酰

6、胺類化學(xué)成分的ESI-MS'’的裂解行為進(jìn)行了研究，對其特征性裂解行為進(jìn)行了深入地分析，探討特征性裂解碎片離子及其強(qiáng)度與結(jié)構(gòu)的關(guān)系，結(jié)合其特征性的UV最大吸收波長和<'1>HNMR數(shù)據(jù)，總結(jié)出一些具有規(guī)律性的結(jié)論。在此基礎(chǔ)上，對含有微量咖薩因型二萜酰胺類成分的總生物堿中的4個組分進(jìn)行HPLC-HR-MS、HPLC-DAD-ESI-MS<'n>、HPLC-NMR測定。根據(jù)以上得出的規(guī)律性結(jié)論和在線測定的譜學(xué)數(shù)據(jù)，推測出其中9個微量的具有類

7、似結(jié)構(gòu)的化合物的結(jié)構(gòu)。通過研究，建立了在線鑒定植物提取物組分中微量咖薩因型二萜酰胺類成分結(jié)構(gòu)的分析方法。 本文對含有多種酚類成分的儀花屬(Lysidicie)植物提取物進(jìn)行了在線結(jié)構(gòu)分析的研究。豆科儀花屬包括兩種植物，即儀花(L. rhodostegia Hance)和短萼儀花(L.brevicalyx Wei)。本課題組曾對儀花(L.rhodostegia)的根一單刀根的化學(xué)成分進(jìn)行了系統(tǒng)的研究，從中分離得到了間苯三酚、二苯乙

8、烯、黃酮類等酚類化合物。鑒于同屬植物化學(xué)成分的相似性，推測其同屬植物短萼儀花中也可能含有類似結(jié)構(gòu)的化合物。為了快速鑒定短萼儀花中化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)，基于同樣的研究思路，首先考察了從單刀根中分離得到的6個間苯三酚、5個二苯乙烯、9個黃酮類化合物的ESI-MS<'n>的裂解行為，對其特征性裂解行為進(jìn)行了深入研究，總結(jié)出特征性裂解碎片離子與結(jié)構(gòu)的關(guān)系。結(jié)合UV特征，闡明了化合物類型、取代基等結(jié)構(gòu)因素與其UV最大吸收波長和質(zhì)譜裂解行為等譜學(xué)特征的關(guān)

9、系，從中得出一些規(guī)律性的結(jié)論。在此基礎(chǔ)上，對短萼儀花提取物中酚類成分的2個組分進(jìn)行了HPLC-HR-MS、HPLC-DAD-ESI-MS<'n>、HPLC-NMR測定，通過與以上結(jié)論進(jìn)行比較分析，推測出其中7個不同類型成分的結(jié)構(gòu)，分別為白藜蘆醇-3-O-(6-O-對羥基桂皮酰基)-B-D-葡萄糖苷(L1)，硫黃菊噢瞬(L2)，柚皮素(L3)，白藜蘆醇-3-O-[6-O-(3-甲氧基-4-羥基)．桂皮?；?β-D-葡萄糖苷(L4)，儀花苷