反萼銀蓮花化學(xué)成分的研究.pdf

1、毛茛科(Ranunenulaceae)銀蓮花屬(Anemone)是在全世界廣泛分布的植物，其中歐洲地區(qū)和亞洲地區(qū)分布的較多，該屬植物的種類多樣，數(shù)量繁多，共有150余種，其中，在我國有約52種。根莖是本屬植物的主要藥用部位，例如：其中被《中華人民共和國藥典》所收載的傳統(tǒng)中藥兩頭尖就是本屬植物多被銀蓮花的根莖。從民間用藥經(jīng)驗積累到現(xiàn)代藥理研究證實，本屬植物多具有祛風(fēng)濕，消癰腫，清熱解毒之功效。近年來研究表明本屬植物含有豐富的化學(xué)成分和顯著

2、的藥理活性，但截止目前，尚未見對本屬植物反萼銀蓮花(A.reflexa)化學(xué)成分和藥理活性研究的相關(guān)報道。
　　本課題首次對反萼銀蓮花( A. reflexa)根莖75％乙醇提取物的正丁醇萃取部分的化學(xué)成分進(jìn)行研究，利用不同手段，如：Sephade x LH-20凝膠柱色譜、正相硅膠柱色譜、ODS反相硅膠柱色譜和HP LC等，從中分離并鑒定20個單體化合物，分別為：ferulic acid(1),β-sitosterol(2)，β

3、5-daucosterol(3)，3β-0-α-L-arabinopyranosyl oleanolic acid(4),3β-0-V-D-glucuronopyranosyl oleanolic acid(5),3β-0-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-[β-D-glucopyranosyl-(l→4)]-α-L-arabinopyranosyl oleanolic acid(6)，pulsatillosi-de

4、D(7)，3β-0-β-D-xylopyranosyl-(l→3)-α-L-rhamnopyranosyl-(l→2)-[β-D-glucopyran-osyl-(1→4)]-β-L-arabinopyranosyl oleanolic acid(8)，3β-0-α-L-rhamnopyranosyl-(l→2)-[β-D-glucopyranosyl-(1→4)-β-D-glucopyranosyl-(1→4)]-α-L-arabin

5、opyranosyl olean- olic acid(9),3β-O-β-D-glucopyranosyl-(l→4)-yff-D-glucopyranosyl-(l→3)-a-L-rhamno-pyranosyl-(1→2)-a-L-arabinopyranosyl oleanolic acid(10)，3β-0-β-D-glucopyranosyl-(1→3)-a-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-[β-D-gluc

6、opyranosyl-(1→4)-β-D-glucopyranosyl-(l→4)]-a-L-arabinopyranosyl oleanolic acid(11),3β-0-β-D-ribopyranosyl-(1→3)-a-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-[β-D-glucopyranosyl-(1→4)-β-D-glucopyranosyl-(1→4)]-α-L-arabinopyranosyl oleanolic

7、 acid(12), anhuienoside D(13)，3β-0-6-0-methyl-glucurono-pyranosyl oleanolic acid28-0-β-D-glucopyranosyl-(1→3)-α-L-rhamnopyranosyl-(1→4)-β-D-glucopyranosyl-(l—6)-β-D-glucopyranoside(14),3β-0-6-0-butyl-glucuronopyran-osyl

8、oleanolic acid28-0-β-D-glucopyranosyl-(l→3)-ot-L-rhamnopyranosyl-(l→4)-β-D-glucopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranoside(15), anhuienoside E(16), hederasaponin Bglucopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranoside(15), anhuienoside E(16)

9、, hederasaponin B(17), hederacolchiside F(18), sieboldianoside B(19), hederacolchiside E(20)。命名為reflexoside A、reflexoside B、reflexoside C、reflexoside D和reflexoside E的5個新化合物分別為9、11、12、14和15，10首次在本屬植物中發(fā)現(xiàn)，所有化合物均首次發(fā)現(xiàn)于本植物中。

10、r>　　通過 MTT法，對6~15進(jìn)行初步的藥理活性研究，發(fā)現(xiàn)6~12對人肝癌 HepG2細(xì)胞有不同程度的細(xì)胞毒性，同時發(fā)現(xiàn)對人早幼粒白血病 HL-60細(xì)胞也具有一定的細(xì)胞毒性，其中6活性最好，IC50值分別為6.98和4.83μmol/L。實驗結(jié)果進(jìn)一步驗證了本課題組總結(jié)的皂苷構(gòu)效關(guān)系，認(rèn)為 C-28位為游離羧基、苷元為齊墩果酸和C-3位連有含α-L-Rha-(1→2)-α-L-Ara-片段的糖鏈的化合物具有較好活性。
　　課題

11、創(chuàng)新性及研究意義：
　　1.本課題對反萼銀蓮花首次開展了化學(xué)研究，分離鑒定了20個單體化合物，其中17個為齊墩果烷型三萜皂苷，包括5個新化合物，1個在本屬植物中首次發(fā)現(xiàn)。
　　2.在分離得到的5個新化合物中的14和15的C-3位分別與葡萄糖醛酸甲酯和葡萄糖醛酸丁酯成苷，經(jīng)查閱文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)這種類型的結(jié)構(gòu)在銀蓮花屬中比較少見。
　　3.從反萼銀蓮花中分離得到的化合物大多數(shù)苷元為齊墩果酸，C-3位與糖成氧苷,同時 C-28位為游