2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡(jiǎn)介

1、研究目的:腦創(chuàng)傷后顱內(nèi)炎癥反應(yīng)促進(jìn)繼發(fā)性腦損傷的發(fā)展、腦水腫的形成、顱內(nèi)壓的增高、神經(jīng)元的凋亡以及神經(jīng)功能的缺失,顯著惡化原發(fā)性損傷造成的危害。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)抑制因子(vascular endothelial growth inhibitor,VEGI)是腫瘤壞死因子超家族成員,因其在多種疾病中具有重要作用而受到了廣泛關(guān)注。VEGI除了具有抑制血管新生的作用外,還能調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)和抑制水腫的生成。本研究利用液壓沖擊法制作小鼠腦外傷模型,觀察

2、分析腹腔注射VEGI對(duì)小鼠顱腦損傷早期神經(jīng)功能,血腦屏障,腦水腫的影響以及對(duì)腦組織局部炎癥反應(yīng)的調(diào)節(jié)作用,探索VEGI在腦外傷急性期是否具有神經(jīng)保護(hù)作用。
  研究方法:選用清潔級(jí)健康成年雄性C57BL/6小鼠共計(jì)180只,按照隨機(jī)化原則分為假手術(shù)組(Sham組)、腦創(chuàng)傷后腹腔注射VEGI組(TBI+VEGI組)和腦創(chuàng)傷后腹腔注射VEGI溶媒組(TBI+Vehicle組)。分組后建立小鼠液壓打擊顱腦創(chuàng)傷模型,VEGI于傷后1小時(shí)、

3、24小時(shí)、48小時(shí)經(jīng)腹腔注射。應(yīng)用改良神經(jīng)功能評(píng)分法(mNSS)評(píng)價(jià)其行為學(xué)功能。TBI小鼠于傷后第1天和3天處死,應(yīng)用干濕重法檢測(cè)各組小鼠傷后腦組織含水量;應(yīng)用伊文思藍(lán)測(cè)定了各組小鼠傷后第3天的血腦屏障滲透率;應(yīng)用免疫組織化學(xué)/免疫熒光組織化學(xué)染色觀察腦創(chuàng)傷后第1天、3天激活的小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞在創(chuàng)傷灶周圍的變化情況。應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色方法觀察各組實(shí)驗(yàn)小鼠的中性粒細(xì)胞在腦創(chuàng)傷后第1天、3天在腦創(chuàng)傷灶的浸潤(rùn)情況,應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附

4、測(cè)定法(ELISA)測(cè)定各組小鼠腦組織中細(xì)胞因子IL-1β和TNF-α變化。應(yīng)用Tunel染色技術(shù)檢測(cè)了各組小鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡的變化情況。通過Morris水迷宮于各組小鼠傷后第7-12天進(jìn)行認(rèn)知功能評(píng)價(jià)。
  研究結(jié)果:液壓打擊后,小鼠遭受創(chuàng)傷后mNSS即刻升高,TBI+VEGI組與TBI+Vehicle組傷后12小時(shí)組間評(píng)分無明顯差異(P=0.136),傷后第1天,TBI+VEGI治療組小鼠評(píng)分低于TBI+Vehicle組,并

5、持續(xù)至傷后第7天,各時(shí)間點(diǎn)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。各創(chuàng)傷組小鼠腦組織HE染色均有TBI后典型病理變化。免疫熒光染色顯示,傷后第1天,各組TBI小鼠創(chuàng)傷側(cè)ED1+小膠質(zhì)細(xì)胞大量激活,并于第3天時(shí)下降。TBI+VEGI組各時(shí)間點(diǎn)ED1+小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量低于TBI+Vehicle組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。免疫組化顯示:傷后第1天,各組TBI小鼠創(chuàng)傷側(cè)GFAP+星形膠質(zhì)細(xì)胞大量激活,第3天時(shí)數(shù)量下降,TBI+VEGI組各時(shí)

6、間點(diǎn)GFAP+星形膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量低于TBI+Vehicle組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。應(yīng)用ELISA檢測(cè)技術(shù)觀察創(chuàng)傷側(cè)的促炎細(xì)胞因子IL-1β和TNF-α濃度發(fā)現(xiàn):在傷后第1天和3天,各組TBI小鼠創(chuàng)傷側(cè)IL-1β和TNF-α水平均高于Sham組,TBI+VEGI組各時(shí)間點(diǎn)IL-1β和TNF-α的水平低于TBI+Vehicle組(P<0.05)。干濕重觀察發(fā)現(xiàn):在傷后第1天和3天,與Sham組相比,TBI+VEGI組和TBI+V

7、ehicle組腦水含量均明顯增加; TBI+VEGI組在1天和3天腦組織的水含量明顯低于TBI+Vehicle組,各時(shí)間點(diǎn)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。伊文思藍(lán)滲透率實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn):傷后第3天,TBI+VEGI組小鼠血腦屏障滲透率低于TBI+Vehicle組(P<0.05)。免疫組化染色顯示,在傷后第1天,各組TBI小鼠創(chuàng)傷灶周圍有大量中性粒細(xì)胞聚集,并于第3天達(dá)到高峰。TBI+VEGI組小鼠腦組織中MPO+中性粒細(xì)胞數(shù)目在傷后第1天、

8、第3天明顯低于TBI+Vehicle組(P<0.05)。Tunel染色觀察小鼠腦創(chuàng)傷后神經(jīng)細(xì)胞的凋亡情況發(fā)現(xiàn):傷后第3天,TBI+VEGI組腦創(chuàng)傷周圍神經(jīng)元的凋亡數(shù)目明顯低于TBI+Vehicle組(P<0.05)。Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)示,隨著觀察時(shí)間延長(zhǎng),不同處理組小鼠認(rèn)知功能逐漸恢復(fù)。與TBI+Vehicle組比較,VEGI治療組小鼠訓(xùn)練第1天認(rèn)知功能無明顯改善(P=0.612)。但從第2天開始,處理組小鼠逃避潛伏期縮短,并維持至

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