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文檔簡介
1、以家蠶微孢子(Nosemabombycis)及帶毒蠶卵為材料,研究家蠶微孢子蟲16SrRNA基因的序列特征、分子進化以及成品卵家蠶微粒子病的PCR檢測方法。 以家蠶微孢子DNA為模板,以16SrRNA基因設(shè)計特異性引物,通過PCR克隆了16SrRNA基因。序列分析顯示,該基因長度為1235bp,缺乏多個被認為是真核生物rRNA基因特征序列的區(qū)域,序列結(jié)構(gòu)特征更多地類似于原核生物的,在進化上,推測微孢子蟲在很早以前與原始真核生物產(chǎn)
2、生分歧;基于16SrRNA基因的分子進化分析顯示,同屬的微孢子蟲可以處于系統(tǒng)進化樹不同的分枝。 從純凈微孢子中提取DNA的研究結(jié)果顯示,每粒微孢子可抽提出13×10'71ag的DNA;PCR法對家蠶微孢子DNA的檢測靈敏度研究結(jié)果顯示,檢測極限為3.25×10-2pg(25μl反應(yīng)體系),即4粒微孢子。 建立從有毒蠶種中提取家蠶微孢子蟲DNA的方法。研究結(jié)果顯示,有毒蠶種催青卵用30%KOH預(yù)處理后,按常規(guī)法抽提的蠶卵總
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