補腎生精丸對腺嘌呤所致生精細胞損傷模型大鼠的干預作用及其機理研究.pdf

1、目的本研究擬通過綜述中醫(yī)學對男性不育癥的認識與治療現(xiàn)狀以及現(xiàn)代醫(yī)學研究進展，并根據(jù)當前男性不育癥治療難點以及中醫(yī)藥治療優(yōu)勢，結(jié)合導師臨床經(jīng)驗，選用腺嘌呤所致腎陽虛型生精細胞損傷動物模型，同時以臨床驗證有效的補腎生精丸(BushenShengjingPill，簡稱BS)為治療藥物，探討B(tài)S對腎陽虛型生精細胞損傷模型大鼠的作用機理，為臨床應用提供藥理學實驗依據(jù)。 方法 實驗動物的分組及給藥：選用3個月齡SD雄性大鼠96只，隨

2、機分為正常組、模型組、BS高劑量組和低劑量組，每組24只?？瞻捉M：喂飼0.5％羧甲基纖維素鈉，10mL/kg；模型組：喂飼腺嘌呤溶液250mg/kg；BS高低劑量組：首先分別喂飼BS混懸液400mg/kg和100mg/kg，40分鐘后喂飼腺嘌呤溶液250mg/kg，實驗總持續(xù)時間均為40d。各組動物分別在開始給藥的第20d、30d和40d各取8只，于末次給藥1h后在安靜狀態(tài)下用10％水合氯醛麻醉，剖腹取腹主動脈血分離血清采用酶免法檢測實

3、驗動物血清生殖內(nèi)分泌激素變化；取出右側(cè)睪丸用10％甲醛液固定，在光學顯微鏡下觀察睪丸組織形態(tài)學改變；離斷右側(cè)附睪組織進行精子活動率、精子計數(shù)觀察；取左側(cè)睪丸采用黃嘌呤氧化酶法檢測睪丸組織超氧化物歧化酶(SOD)、采用硫代巴比妥酸比色法測定丙二醛(MDA)含量；采用硝酸還原酶法檢測一氧化氮合酶(NOS)活性及一氧化氮(NO)含量；用TUNEL法檢測生精細胞凋亡情況。 結(jié)果 實驗第20d模型精子活動率、精子計數(shù)、FSH、LH

4、、T值、SOD活性及MDA含量、NOS活性及NO含量與其它三組間存在著顯著的統(tǒng)計學差異，可以判定實驗第20d造模沒有成功。實驗第30d模型組各項指標與其它三組間存在著顯著的統(tǒng)計學差異，BS高劑量組和低劑量組各項指標均與模型組和正常組具有顯著的統(tǒng)計學差異，且BS高劑量組優(yōu)于BS低劑量組。實驗第40d模型組各項指標與其它三組間存在著顯著的統(tǒng)計學差異，BS高劑量組和低劑量組各項指標與模型組比較具有顯著的統(tǒng)計學差異，但療效和作用機制指標沒有比3

5、0d明顯，表明實驗第40d模型組大鼠生精細胞損傷嚴重。 結(jié)論 腺嘌呤能夠使模型大鼠出現(xiàn)綣臥、反應遲鈍等類似腎陽虛的癥狀；能夠使模型大鼠精子活動率下降，生殖腺臟器系數(shù)改變；能夠使模型大鼠睪丸曲細精管萎縮，管腔內(nèi)上皮變薄等組織形態(tài)學改變。腺嘌呤能夠使模型大鼠血清T、LH值降低；睪丸組織NOS活性及NO含量增高；SOD活性降低，MDA含量增高；生精細胞凋亡明顯增強。BS可顯著提高腎陽虛型生精細胞損傷模型大鼠的精子數(shù)量和質(zhì)量，改