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1、【目的】 局灶性節(jié)段性腎小球硬化(focal segmental glomerLllOSClerosis,F(xiàn)SGS)是呈進(jìn)行性發(fā)展的原發(fā)性腎小球疾病,對(duì)糖皮質(zhì)激素和細(xì)胞毒藥物治療反應(yīng)差,最終多發(fā)生慢性腎功能衰竭。近年來(lái)的研究表明FSGS的基本病理特征是足細(xì)胞損傷,足細(xì)胞損傷或丟失在FSGS的啟動(dòng)和發(fā)展中起關(guān)鍵性作用,足細(xì)胞數(shù)量減少的程度與腎小球硬化之間具有顯著的相關(guān)性。本課題利用阿霉素復(fù)制FSGS大鼠模型,然后用羅格列酮治療,觀
2、察羅格列酮對(duì)腎小球足細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)及Podocin、CD2AP mRNA表達(dá)的影響,以探討羅格列酮對(duì)足細(xì)胞的保護(hù)價(jià)值及可能機(jī)制,為臨床應(yīng)用羅格列酮防治FSGS,延緩腎小球硬化疾病的進(jìn)展提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 【方法】 SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、腎病組、治療組。腎病組用重復(fù)尾靜脈注射阿霉素建立FSGS大鼠動(dòng)物模型(Adriamycin indtmed nephritis,AMD),治療組在注射阿霉素造模后用羅格列酮治療12周;腎組織H
3、E、PASM染色,用光學(xué)顯微鏡觀察各組腎小球、腎小管間質(zhì)的病理形態(tài)變化并用半定量方法計(jì)算腎小球硬化指數(shù);用透射電鏡觀察各組腎小球足細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的改變并用半定量方法計(jì)算足細(xì)胞融合程度;各組腎組織提取RNA,半定量逆轉(zhuǎn)錄-多聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè):Podocin、CD2APmRNA的表達(dá)量。 【結(jié)果】1.羅格列酮對(duì)腎組織病理形態(tài)的影響對(duì)照組腎組織無(wú)明顯病理改變。腎病組腎小球系膜基質(zhì)中度至重度增生并呈彌漫性分布,呈現(xiàn)腎小球局
4、灶性節(jié)段性硬化,間質(zhì)有炎性細(xì)胞浸潤(rùn),小管灶性擴(kuò)張,蛋白管型多見(jiàn)。治療組部分腎小球系膜基質(zhì)呈局灶性輕度增生,少見(jiàn)硬化的腎小球,少量炎性細(xì)胞局灶性浸潤(rùn),腎小管蛋白管型可見(jiàn)。治療組腎小球硬化指數(shù)比腎病組明顯減輕,差異具有顯著性(P<0.01);治療組與對(duì)照組比較,差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 2.羅格列酮對(duì)足細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響對(duì)照組足細(xì)胞體及足突無(wú)明顯病理改變,腎病組足細(xì)胞溶酶體增多,部分空泡變性,足突廣泛融合,部分脫落,偶見(jiàn)
5、基底膜裸露,毛細(xì)血管塌陷。治療組足細(xì)胞體無(wú)明顯病理改變,足突部分融合。3組問(wèn)足突融合程度比較,均有顯著性差異(P<0.01),治療組足突融合程度比腎病組明顯減輕,但仍重于對(duì)照組(P<0.01)。 3.羅格列酮對(duì)足細(xì)胞Podocin、CD2AP mRNA表達(dá)的影響腎病組及治療組Podocin、CD2AP mRNA的表達(dá)量上調(diào),與對(duì)照組比較有顯著性差異(P<0.01);治療組Podocin、CD2AP mRNA的表達(dá)量低于腎病組,差
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