白藜三醇對實驗性動脈粥樣硬化家兔心臟缺血再灌注損傷的保護作用.pdf

1、目的: 采用結扎實驗性動脈粥樣硬化家兔左冠狀動脈前降支法建立在體急性心肌缺血再灌注模型，觀察白藜三醇(Resveratrol，RV)慢性給藥對家兔缺血再灌注心臟心功能的影響以及白藜三醇結合蛋白(Resveratrol bindingproteins，RBPs)-NQO2、GST-pi表達水平的變化，探討白藜三醇對缺血再灌注心肌的保護作用并初步探討其相關機制。 方法: 以高脂飲食聯(lián)合免疫損傷的方法建立兔的動脈粥樣硬化模型：24只雄

2、性同本大耳白兔隨機分成3組，分別為：正常對照(Control)組，即C組，喂飼正常飼料6周：動脈粥樣硬化(Atherosclerosis，AS)組，即AS組，予小牛血清1mg/ml耳緣靜脈一次性注射后，即喂飼高脂飼料6周：白藜三醇(Resveratrol，RV)組，即RV組，采用與AS組相同的方法建立AS模型，同時予RV(4mg/kg)灌胃6周。6周后建立家兔在體急性心肌缺血再灌注模型，各組均予以結扎LAD 30min，再灌注2h后取材

3、。 Maclab生理記錄儀監(jiān)測心電圖變化，記錄左室舒張末壓(LVEDP)、左室內壓最大上升/下降速率(±dp/dtmax)；分別用硫代巴比妥酸法和黃嘌呤氧化酶法測定缺血再灌注前后血漿MDA、SOD水平；RT-PCR法檢測心肌組織中NQO2、GST-pimRNA表達水平，Western-Blot法檢測心肌組織NQO2、GST-pi、NF-κBp65、IκBα、JNK、p-JNK蛋白表達水平，HE染色觀察各組心肌形態(tài)學改變。

4、 結果: 1.RT-MR結果：測定再灌注2h后心肌組織NQO2、GST-pi mRNA表達水平，結果顯示：RV組GST-pi、NQO2的表達較AS組均明顯增加(P<0.05)，但與C組比較未發(fā)現(xiàn)有統(tǒng)計學差異(P>0.05)，AS組GST-pi、NQO2的表達較C組明顯減少(P<0.05)。 2.Western-Blot結果：測定再灌注2h后心肌組織蛋白GST-pi、NQO2、NF-κBp65、IκBα、JNK、p-JNK

5、表達水平，結果顯示：①RV組GST-pi、NQO2、IκBα的表達較AS組咀顯增加(P<0.05)，但與C組比較未發(fā)現(xiàn)有統(tǒng)計學差異(P>0.05)，AS組GST-pi、NQO2、IκBα的表達較C組明顯減少(P<0.05)：②RV組NF-κBp65、p-JNK的表達較AS組明顯減少(P<0.05)，但與C組比較未發(fā)現(xiàn)有統(tǒng)計學差異(P>0.05)，AS組NF-κp65、p-JNK的表達較C組明顯增加(P<0.05)；③JNK的表達在各組間

6、無明顯差異(P>0.05)。 3.血漿生化指標：(1) 缺血前，MDA、SOD值在三實驗組間均無統(tǒng)計學差異(P>0.05)；(2) 再灌注2h后：①與缺血前比較，三組MDA明顯升高，SOD降低，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；②組間比較，RV組MDA值明顯低于AS組(P<0.05)，與C組比較未發(fā)現(xiàn)有統(tǒng)計學差異(P>0.05)，AS組MDA值明顯高于C組(P<0.05)；RV組SOD值明顯高于AS組(P<0.05)，與C組比較

7、未發(fā)現(xiàn)有統(tǒng)計學差異(P>0.05)，AS組SOD值明顯低于C組(P<0.05). 4.心功能參數(shù)：(1) 缺血前，左室舒張末壓，左室內壓最大上升、下降速率在三實驗組間均無統(tǒng)計學差異(P>0.05)；(2) 再灌注2h后：①與缺血前比較，三組LNEDP升高，±dp/dtmax降低，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；②組間比較，RV組LVEDP低于AS組(P<0.01)，與C組比較無統(tǒng)計學差異(P>0.05)，AS組LVEDP高于C

8、組(P<0.05)；RV組±dp/dtmax高于AS組(P<0.01)，與C組比較無統(tǒng)計學差異(P>0.05)，AS組±dp/dtmax低于C組(P<0.05)。 5.光鏡結果：HE染色光鏡下觀察，AS組心肌損傷病理改變較明顯：部分心肌纖維斷裂、溶解，收縮帶多、范圍大，胞漿染色較濃，心肌間質水腫明顯；RV組，C組心肌損傷病理改變輕于AS組：心肌纖維排列較整齊，斷裂溶解的肌纖維較少，收縮帶少、范圍小，胞漿染色較淡，心肌間質輕度水腫

9、。 6.相關分析結果：NQO2，GST-pi的表達與±dp/dtmax呈正相關(r=0.762，0.946，0.840，0.914 P<0.05)；p-JNK、NF-κBp65的表達與±dp/dtmax呈負相關(r=-0.760，-0.788，-0.863，-0.765.P<0.05)。 結論： 1.白藜三醇可以減輕實驗性動脈粥樣硬化家兔心肌缺血再灌注損傷。 2.白藜三醇可以上調實驗性動脈粥樣硬化家兔缺血