淫羊藿素對(duì)肝臟缺血再灌注損傷保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)性研究.pdf

1、[研究背景和目的]肝臟具有門(mén)靜脈和肝動(dòng)脈兩套血供系統(tǒng)。其中,門(mén)靜脈占入肝血流的70％-80％,肝動(dòng)脈僅占20％-30％。肝臟獨(dú)特的解剖結(jié)構(gòu)特點(diǎn),決定了肝臟較其他一些臟器的血流更為豐富。在現(xiàn)代肝臟外科手術(shù)中,對(duì)肝十二指腸韌帶內(nèi)肝固有動(dòng)脈和門(mén)靜脈主干進(jìn)行阻斷,能夠大大減少術(shù)中出血。這種被稱(chēng)為"Pringle"的手法,從首次在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中獲得成功到今天被廣泛運(yùn)用于臨床已有近百年的歷史。雖然該法操作簡(jiǎn)單、很大程度上控制了肝創(chuàng)面的出血,但同時(shí)也極易

2、引起肝臟的缺血再灌注損傷(IRI),而IRI也是導(dǎo)致肝臟切除術(shù)后肝功不全和肝移植術(shù)后肝原發(fā)性無(wú)功能的主要原因之一。如何在既減少肝臟手術(shù)切除造成的大量失血的同時(shí),又能減輕肝門(mén)阻斷帶來(lái)的缺血再灌注損傷,是肝臟外科臨床中亟待解決的重要問(wèn)題。 目前應(yīng)用于臨床保護(hù)肝臟損傷的藥物品種較多,但療效均不十分理想。多種藥物聯(lián)合應(yīng)用可能會(huì)有助于術(shù)后肝功能的恢復(fù),但作用有限,且藥物總量的增加勢(shì)必會(huì)加重肝臟代謝的負(fù)擔(dān),甚至?xí)a(chǎn)生肝臟毒性作用。因此,進(jìn)一

3、步研發(fā)能夠更有效地改善術(shù)后肝臟功能,毒副作用少的新一代藥物,無(wú)疑具有十分重要的臨床價(jià)值。 淫羊藿素(Icaritin),分子量368,是由天然植物淫羊藿(Epmedium)中提取的黃酮類(lèi)單體化合物。已有研究表明：淫羊藿素具有誘導(dǎo)細(xì)胞增殖分化、擴(kuò)張心腦血管、抗腫瘤、類(lèi)雌激素、提高性機(jī)能以及抗骨質(zhì)疏松等作用?；趯?duì)同類(lèi)化合物的研究以及淫羊藿素分子結(jié)構(gòu)的相關(guān)分析提出以下猜測(cè)：淫羊藿素依靠清除氧自由基(ROS)、抗脂質(zhì)過(guò)氧化以及促進(jìn)內(nèi)皮

4、型一氧化氮合成酶(eNOS)的表達(dá),增加NO的分泌來(lái)發(fā)揮對(duì)缺血再灌注損傷器官的保護(hù)作用。本研究采用藥物預(yù)處理的方式,通過(guò)建立大鼠肝臟缺血再灌注損傷模型以證實(shí)如上假說(shuō),為能夠行之有效地解決前述臨床問(wèn)題在基礎(chǔ)研究領(lǐng)域做一次新的嘗試。 [研究方法] 1.淫羊藿素脂質(zhì)體的制備：采用薄膜分散法將淫羊藿素粉劑制備為淫羊藿素脂質(zhì)體,供動(dòng)物實(shí)驗(yàn)用。 2.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)：選取健康雄性SD大鼠,隨機(jī)分為淫羊藿素脂質(zhì)體組(A)、空白脂質(zhì)體組

5、(B)、單純損傷組(C)以及假手術(shù)組(D)。除假手術(shù)組外,所有大鼠70％肝臟(肝左葉和肝中葉)的血流阻斷60min,之后血流重新恢復(fù)。于再灌注2h和6h采集大鼠血液及肝組織標(biāo)本,進(jìn)行以下檢測(cè)：1)血清ALT、AST含量；2)肝組織中丙二醛(MDA)和NO含量；3）肝組織中超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合成酶(NOS)、誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)、eNOS以及髓過(guò)氧化物酶(MPO)活力；4）肝臟病理組織形態(tài)學(xué)；5）肝細(xì)胞凋亡指數(shù)

6、(AI)。 [研究結(jié)果] 1.經(jīng)初步評(píng)價(jià)淫羊藿素脂質(zhì)體中脂質(zhì)體含量高、藥物包封良好,已能滿足動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中靜脈注射所需。 2.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果 (1)再灌注2h,A組中的ALT、MDA、MPO以及AI較B、C兩組有明顯下降； (2)再灌注6h,A組中的ALT、AST、MDA和AI較B、C兩組有明顯降低,同時(shí)SOD、NOS、eNOS水平則顯著升高； (3)不同再灌注時(shí)間點(diǎn),病理組織形態(tài)學(xué)觀察的肝臟損