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文檔簡介
1、新城疫(ND)和傳染性支氣管炎(IB)一直是危害我國養(yǎng)禽業(yè)的兩大重要病毒性傳染病。雖然預(yù)防這兩種疫病的弱毒疫苗早已研制成功并得到廣泛應(yīng)用，但是由于受母源抗體等因素的干擾，常常發(fā)生免疫失敗。為了探索一種能夠不受母源抗體干擾，可在1日齡進行基礎(chǔ)免疫接種、縮短或消除雛雞免疫空白期的新型疫苗，用于預(yù)防ND和IB，以保障養(yǎng)雞業(yè)的健康發(fā)展，本論文進行了有關(guān)NDV和IBV核酸疫苗的研究。為了研究NDV核酸疫苗的免疫功效，本論文首先通過PCR方法自含N
2、DV Z株F基因的陽性質(zhì)粒中擴增了F基因，然后將其插入到真核表達載體pcDNA3.1/V5-His-TOPO中，陽性克隆經(jīng)PCR擴增和核酸內(nèi)切酶酶切鑒定準(zhǔn)確無誤，核酸序列測定結(jié)果與原始基因比較，同源性＞99﹪，啟始密碼子和終止密碼子未出現(xiàn)變異，將該重組質(zhì)粒命名為pcDNANDVZF。將pcDNANDVZF在脂質(zhì)體作用下轉(zhuǎn)染CEF細(xì)胞，用間接免疫熒光試驗(IFA)檢測，結(jié)果證明pcDNANDVZF可在CEF細(xì)胞中大量表達F蛋白。將poDN
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