PAMAM包覆葛根素脂質(zhì)體眼部釋藥系統(tǒng)的構建及初步評價.pdf

1、滴眼劑作為傳統(tǒng)的眼部治療劑型，因眨眼、眼球運動及鼻淚管引流等因素，使得藥物大量損失，加之角膜的屏障作用使實際吸收進入眼部的藥物不足5[％]。因此，改善滴眼劑的生物利用度成為當務之急。本論文以臨床治療青光眼的常用藥葛根素(Puerarin，PUE)為模型藥物，以文獻報道可以打開細胞緊密連接、增加藥物細胞膜透過性的聚酰胺-胺樹枝狀聚合物大分子(poly(amidoa-mine)，PAMAM)為包覆材料制備PAMAM包覆的PUE脂質(zhì)體，通過兔

2、離體角膜滲透試驗、角膜滯留時間試驗和角膜殘留藥量試驗考察PAMAM包覆脂質(zhì)體對角膜的藥物透過性，藥物的角膜滯留時間的影響，為開發(fā)改善眼部藥物生物利用度的新型藥物載體進行嘗試。主要從以下幾方面進行系統(tǒng)研究。
　　 一、建立了測定PUE含量和PUE脂質(zhì)體包封率的HPLC方法。采用單因素考察，以包封率為考察指標，對薄膜超聲分散法制備PUE脂質(zhì)體的工藝及處方進行研究。結果表明：大豆磷脂/膽固醇/PUE=10/2/1時，包封率可以達到50

3、.6[％]以上，而且工藝重現(xiàn)性良好。這為PAMAM包覆PUE脂質(zhì)體的制備奠定基礎。
　　 二、制備了樹枝狀聚合物聚酰胺-胺2代和3代(PAMAM G2、PAMAM G3)包覆的PUE脂質(zhì)體，考察脂質(zhì)體包覆前后的粒徑、Zeta電位的變化。用異硫氰酸熒光素(FITC)標記PAMAM，采用透射電鏡和激光掃描共聚焦顯微鏡分別觀察PAMAM包覆脂質(zhì)體和FITC-PAMAM包覆脂質(zhì)體的外部形態(tài)。建立了測定FITC-PAMAM包覆脂質(zhì)體包覆率

4、的熒光分光光度法。結果顯示：包覆后的脂質(zhì)體粒徑略有增加，但沒有顯著性差異，Zeta電位由負變正，并且隨著PAMAM與磷脂投料比例的增加而增大。透射電鏡和激光掃描共聚焦顯微鏡觀察顯示，PAMAM能較好的包覆于脂質(zhì)體表面。PAMAM G2的包覆率要明顯高于PAMAMG3。
　　 三、對PAMAM包覆脂質(zhì)體的體外釋放行為和穩(wěn)定性、凍干保護劑的篩選進行了考察，結果表明：PAMAM包覆前后的脂質(zhì)體釋藥特性相似，與PUE水溶液相比，均具有明

5、顯的緩釋作用。說明PAMAM僅在脂質(zhì)體表面形成了一層帶電外殼，不影響PUE對磷脂膜的滲透，同時也沒有對磷脂膜產(chǎn)生破壞。穩(wěn)定性試驗顯示，PAMAM包覆前后的脂質(zhì)體在室溫下不穩(wěn)定，低溫下(4℃冰箱)2個月內(nèi)粒徑和包封率均無明顯變化。使用混合凍干保護劑(甘露醇和蔗糖)可達到最佳保護效果。
　　 四、以PUE水溶液和未包覆PUE脂質(zhì)體為對照，對不同代數(shù)的PAMAM包覆脂質(zhì)體的角膜滲透性、角膜前滯留時間和角膜殘留藥量進行考察。同時考察了P

6、AMAM包覆脂質(zhì)體中，不同的摩爾投料比下(PAMAM/磷脂=0.1、0.5、1.0、2.0mol[％])，PAMAM對角膜滲透性的影響，計算滲透參數(shù)。結果表明：PAMAM包覆脂質(zhì)體的角膜累積透過量、(表觀滲透系數(shù))、s J(穩(wěn)態(tài)流量)均明顯高于PUE水溶液和未包覆脂質(zhì)體(P＜0.01)，且投料比為PAMAMG2(1.0mol[％])和PAMAM G3(0.5mol[％])時促角膜滲透性為最大(P＜0.01)。PAMAM包覆脂質(zhì)體的角膜前