PCDH17,一個(gè)新的甲基化調(diào)控的胃腸腫瘤抑癌基因.pdf

1、在世界范圍內(nèi)，胃腸道腫瘤是人類最常見且最主要的導(dǎo)致癌癥死亡的惡性腫瘤之一。近年來，腫瘤抑癌基因的表觀遺傳調(diào)控失調(diào)被認(rèn)為是腫瘤發(fā)生與發(fā)展的重要機(jī)制。
　　 目的：我們發(fā)現(xiàn)了Cadherin超家族中的一個(gè)新的腫瘤抑癌基因PCDH17，該基因在胃腸道腫瘤中啟動(dòng)子被甲基化，因此我們希望通過相關(guān)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證該基因的功能并闡明其與胃腸道腫瘤發(fā)生和發(fā)展的可能機(jī)制。
　　 方法：通過MSP(methylation-specificPC

2、R)和BGS(bisulfitegenomesequencing)檢測(cè)PCDH17的甲基化狀態(tài)；通過半定量RT-PCR和免疫組化檢測(cè)正常組織和腫瘤組織中PCDH17的表達(dá)水平；通過體外轉(zhuǎn)染，獲得穩(wěn)定表達(dá)PCDH17的胃癌和大腸癌細(xì)胞株，觀察體外PCDH17對(duì)細(xì)胞表型的影響，包括細(xì)胞的增殖能力和細(xì)胞的遷移能力等，并通過建立裸鼠皮下種植模型進(jìn)一步觀察體內(nèi)PCDH17對(duì)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的影響。
　　 結(jié)果：PCDH17在大多數(shù)腫瘤細(xì)胞和腫

3、瘤組織中表達(dá)沉默或降低，而且在這些表達(dá)沉默或降低的腫瘤細(xì)胞和腫瘤組織中PCDH17均被檢測(cè)到高度甲基化，但在胃腸道正常粘膜組織中PCDH17卻未被檢測(cè)到甲基化的發(fā)生。PCDH17蛋白在胃腸道正常粘膜組織中呈高表達(dá)(正常胃粘膜組織中高表達(dá)率：100％；正常腸粘膜組織中高表達(dá)率：90%)，而在大部分胃腸腫瘤組織中出現(xiàn)表達(dá)缺失(僅16.7%的胃癌樣本顯示低表達(dá)；16%的腸癌樣本顯示低表達(dá))。PCDH17蛋白的表達(dá)與結(jié)直腸癌的低分期(P=0.0

4、27)和較少的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P=0.039)顯著相關(guān)。細(xì)胞株轉(zhuǎn)染PCDH17后，通過體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)PCDH17能抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)、促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞出現(xiàn)自噬現(xiàn)象。
　　 結(jié)論：PCDH17是一個(gè)新的腫瘤抑癌基因，其在胃腸道腫瘤中表達(dá)沉默或降低。PCDH17甲基化在胃腸道腫瘤中是一個(gè)經(jīng)常發(fā)生的、腫瘤特異的分子事件，甲基化的PCDH17具有作為一個(gè)腫瘤標(biāo)志物用于胃腸道腫瘤的早期診斷和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的潛能。腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)入PCDH