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1、目的:心臟移植是治療終末期心臟疾病的有效方法之一,已被許多醫(yī)院采用。但是急性排斥反應(yīng)的發(fā)生,以及如何有效地檢測(cè)和防治急性排斥反應(yīng),是關(guān)系到心臟移植成敗的關(guān)鍵問(wèn)題。本實(shí)驗(yàn)試圖了解青藤堿(sinomenine SIN)在大鼠心臟移植急性排斥反應(yīng)的作用,及血清透明質(zhì)酸(hyaluronan HA)在心臟移植后的變化,及其是否可以作為心臟移植排斥指標(biāo)。 材料與方法:選用清潔級(jí)雄性Wistar,SD大鼠分別作為供體及受體,各24只,體重2
2、50-300g,建成腹部異位心臟移植模型后,隨機(jī)分為2組:對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)組(SIN)組,每組12只。 采用改良Ono術(shù)式,2%戊巴比妥腹腔注射麻醉。受體開(kāi)腹,分離腎靜脈以下腹主動(dòng)脈與下腔靜脈1cm左右備用,無(wú)菌溫鹽水紗布覆蓋。供體麻醉,由陰莖里背靜脈注射肝素,全身肝素化后,開(kāi)胸、心臟表面置冰屑降溫,升主動(dòng)脈顧行灌0-4℃心臟停跳液5-10ml,心臟在體停跳,結(jié)扎血管后,取心臟于0-4℃平衡液中。吻合方法:將供心主動(dòng)脈、肺動(dòng)脈分別與
3、受體腹主動(dòng)脈、下腔靜脈行端側(cè)吻合,開(kāi)放后,移植心冠狀動(dòng)脈血液灌注,自動(dòng)復(fù)跳。止血后縫合腹部切口,保溫待動(dòng)物自然蘇醒。動(dòng)物模型成功的標(biāo)志,移植心搏動(dòng)72小時(shí)。實(shí)驗(yàn)組大鼠給予青藤堿30 mg/kg/day.i.p.,對(duì)照組給予生理鹽水0.5 ml/day.i.p。各組每天觸摸腹部,觀察移植心搏動(dòng)情況。分別在術(shù)后第4天,6天隨機(jī)取6只大鼠處死,采集心臟及血液,摘取移植心左室壁組織,行一般病理切片檢查排斥情況(按Stanford分級(jí)標(biāo)準(zhǔn),HE染
4、色);血液標(biāo)本低溫3000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘,取血清,分裝后一20℃保存待測(cè)HA.運(yùn)用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。對(duì)兩組移植心臟存活時(shí)間,血清HA濃度數(shù)據(jù),以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,進(jìn)行組間t檢驗(yàn);排斥反應(yīng)等級(jí)評(píng)分比較選用Mann-Whitney u檢驗(yàn),以P<0.05為有顯著差異的統(tǒng)計(jì)學(xué)指標(biāo)。 結(jié)果:大鼠心臟移植急性排斥反應(yīng)時(shí)的病理學(xué)改變包括:心肌組織內(nèi)淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞浸潤(rùn),心肌壞死,間質(zhì)水腫等。經(jīng)SIN
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