2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的：研究融合蛋白VEGF-TCS的原核表達(dá)、純化及其對(duì)宮頸癌HeLa細(xì)胞的影響,以期為宮頸癌的治療尋找新的方法。
　　方法：重疊延伸PCR得到目的片段VEGF-Linker,克隆入表達(dá)載體pET-28a(+)-TCS,將成功構(gòu)建的質(zhì)粒pET-28a(+)-VEGF-Linker-TCS轉(zhuǎn)化入E.coli BL21(DE3),經(jīng)IPTG誘導(dǎo)表達(dá),用Ni-NTA樹(shù)脂對(duì)誘導(dǎo)表達(dá)的融合蛋白進(jìn)行純化,Western-blot鑒定純化后融合

2、蛋白,MTT法分別檢測(cè)不同濃度的VEGF-TCS及TCS對(duì) Hela細(xì)胞生長(zhǎng)的影響,用流式細(xì)胞儀分別檢測(cè)VEGF-TCS及TCS對(duì)Hela細(xì)胞凋亡的作用。
　　結(jié)果：(1)成功構(gòu)建原核表達(dá)pET-28a(+)-VEGF-Linker-TCS。(2)經(jīng) IPTG誘導(dǎo)表達(dá)后用Ni-NTA樹(shù)脂純化后可以獲得融合蛋白 VEGF-TCS。(3)MTT法顯示 VEGF-TCS和TCS對(duì) Hela細(xì)胞增長(zhǎng)都具有抑制作用且隨著應(yīng)用濃度的增加,細(xì)胞

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