日本血吸蟲蟲卵抗原干預(yù)實(shí)驗(yàn)性腦脊髓炎的研究.pdf

1、目的:1、用髓鞘蛋白脂質(zhì)蛋白多肽PLP<,178-191>作為抗原來(lái)誘發(fā)制作具有慢性緩解復(fù)發(fā)性特點(diǎn)的實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎(EAE)小鼠模型,并且研究該肽段的免疫學(xué)特性.2、利用日本血吸蟲蟲卵抗原(SEA)來(lái)干預(yù)髓鞘蛋白脂質(zhì)蛋白多肽PLP<,178-191>誘發(fā)的實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎(EAE)小鼠模型,試圖探討寄生蟲感染與EAE的關(guān)系.3、從細(xì)胞因子出發(fā),探討SEA對(duì)EAE模型干預(yù)的可能機(jī)制.材料和方法:1、應(yīng)用PLP<,178-

2、191>抗原、福氏佐劑和結(jié)核桿菌免疫雌性SJL/J小鼠,并且尾靜脈注射百日咳桿菌,誘發(fā)EAE小鼠動(dòng)物模型.2、用不同濃度的PLP<,178-191>體外刺激PLP<,178-191>免疫的小鼠淋巴結(jié)細(xì)胞,MTT法檢測(cè)最佳刺激細(xì)胞增殖的PLP<,178-191>濃度.3、制備EAE小鼠前用血吸蟲蟲卵抗原干預(yù)小鼠,觀察每日小鼠的行為學(xué)評(píng)分,并作病理檢查,觀察炎癥和神經(jīng)脫髓鞘情況.4、日本血吸蟲蟲卵抗原和PLP<,178-191>聯(lián)合免疫后取

3、淋巴結(jié)細(xì)胞培養(yǎng),利用不同抗原刺激細(xì)胞增殖,ELISA法測(cè)定上清細(xì)胞因子(IL-4、IFN-γ)的含量.結(jié)論:1、以PLP<,178-191>為抗原免疫SJL/J雌性小鼠誘發(fā)EAE與PLP<,139-151>誘發(fā)的模型比較,同樣具有模型穩(wěn)定、發(fā)病率高和緩解復(fù)發(fā)的特點(diǎn),并且發(fā)病多樣,病理改變具有炎性浸潤(rùn)和脫髓鞘表現(xiàn),可以用于多發(fā)性硬化的研究.同時(shí)PLP<,178-191>體外刺激淋巴結(jié)細(xì)胞增殖的最佳刺激強(qiáng)度較小(5ug/ml),說(shuō)明抗原性相