中藥血竭降血糖有效成分的篩選、分離與分析.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)室首次發(fā)現(xiàn)血竭對(duì)α-葡萄糖苷酶具有強(qiáng)抑制作用,若以拜爾公司生產(chǎn)的降糖藥物拜糖萍有效成分(Acarbose)作對(duì)照,血竭的抑制活力遠(yuǎn)高于拜糖萍,是一種極具開發(fā)價(jià)值的潛在的新一代降糖藥物,但至今對(duì)血竭降血糖有效成分的研究尚未有人報(bào)道.本課題以對(duì)Ⅱ型糖尿病有確切療效的中藥血竭作為研究對(duì)象,在血竭對(duì)α-葡萄糖苷酶具有顯著抑制活性的大量實(shí)驗(yàn)研究事實(shí)的基礎(chǔ)上,運(yùn)用先進(jìn)的超臨界流體萃取技術(shù)(SFE)、高效液相制備色譜以及經(jīng)典的硅膠柱層析技術(shù),并

2、與活性指導(dǎo)下的導(dǎo)向分離技術(shù)(bioactivity-guided isolation)相結(jié)合,分離提取血竭α-葡萄糖苷酶抑制有效成分單體化合物,從而為新一代降糖藥物的開發(fā)提供理論依據(jù),具有很強(qiáng)的潛在經(jīng)濟(jì)效益.本課題探討了壓力、溫度、時(shí)間、CO<,2>流量及夾帶劑對(duì)血竭超臨界流體萃取工藝的影響,建立了血竭有效部位的超臨界流體萃取最佳工藝路線,該工藝為:萃取壓力和溫度分別為25MPa和40℃;解析釜Ⅰ壓力和溫度為7MPa和60℃;解析釜Ⅱ壓

3、力和溫度為6.4MPa和40℃;CO<,2>流量為30Kg/h;時(shí)間為2小時(shí),夾帶劑甲醇比例為10﹪.研究表明,該工藝路線簡單可行,萃余物α-葡萄糖苷酶抑制活性比血竭全粉提高了29.8﹪,從而為血竭有效部位的大規(guī)模工業(yè)化分離奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ).本課題通過對(duì)血竭各組分的高效液相色譜峰面積和相應(yīng)酶抑制比活力之間的相關(guān)性進(jìn)行分析研究,篩選確定了血竭降血糖有效組分,并應(yīng)用硅膠柱層析、半制備型高效液相色譜制備和重結(jié)晶等技術(shù),分離提取得到該有效成分單