組織型纖維蛋白溶解酶原激活劑缺失突變體治療視網(wǎng)膜動脈阻塞的實驗研究.pdf

1、目的： 1．研究在兔眼運用光化學(xué)法建立視網(wǎng)膜動脈阻塞(retinalarteryocclusion，RAO)動物模型，動態(tài)觀察視網(wǎng)膜動脈的形態(tài)改變，評價此種方法的有效性、安全性和可重復(fù)性。 2．研究應(yīng)用組織型纖維蛋白溶解酶原激活劑缺失突變體(Reteplase,r-PA)和重組組織型纖維蛋白溶解酶原激活劑(Recombinanttissue-typeplasminogenactivator,rt-PA)在兔眼RAO模型的

2、治療效果，動態(tài)觀察視網(wǎng)膜動脈改變、檢測血液凝血和纖溶指標(biāo)以及觀察有無并發(fā)癥等，對比評價2種藥物的有效性、安全性。 方法： 1．光化學(xué)法誘導(dǎo)兔視網(wǎng)膜動脈阻塞模型的研究 健康成年新西蘭白兔10只，經(jīng)裂隙燈、眼底鏡等檢查眼部無異常，任選一只眼作為實驗眼，另一只眼為對照眼。按50mg／kg劑量白耳緣靜脈注入5％孟加拉紅，采用光化學(xué)法制備RAO模型，并于1h、24h、3d行直接眼底鏡、眼底照相檢查雙眼和FFA檢查實驗眼；3

3、d后將實驗兔以空氣栓塞法處死，摘除眼球行組織學(xué)檢查。 2．應(yīng)用r-PA、n一PA治療兔視網(wǎng)膜動脈阻塞的實驗研究 成功建立RAO模型的新西蘭白兔45只分為3組：r-PA組、n一PA組和對照組，各15只，分別經(jīng)耳緣靜脈予r-PA溶液(劑量0．3MU／kg)、ft-PA溶液(劑量1．7mg&g)和注射用水。各組在給予藥物后4h行直接眼底鏡、眼底照相檢查雙眼和FFA檢查實驗眼，1天后再行FFA檢查觀察有無血栓再形成；各組于給予藥

4、物后1h、2h、3h和4h抽血查PT、APTT、TT、Fbg和D．二聚體(D-Dimer)，并于4h行頭顱MRI檢查有無顱內(nèi)出血和直接眼底鏡觀察有無玻璃體出血；24h后空氣栓塞法處死實驗兔，摘除實驗眼行組織學(xué)檢查。 結(jié)果： 1．光化學(xué)法誘導(dǎo)兔視網(wǎng)膜動脈阻塞模型的研究 9只實驗眼經(jīng)直接眼底鏡觀察和FFA檢查證實建立RAO，眼球組織切片光鏡下檢查可見視網(wǎng)膜動脈內(nèi)血栓，血管壁基本完整，未見明顯的壞死或變薄。2．應(yīng)用r一

5、PA、rt一PA治療兔視網(wǎng)膜動脈阻塞的實驗研究 給藥后4h，r-PA組動脈完全再通率為86．67％，rt一PA組為66．67％；r-PA組和rt-PA組與對照組比較有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P<0．05)，r-PA組與n一PA組比較無明顯統(tǒng)計學(xué)意義。24h后再次行FFA檢查未見血栓再形成。r-PA組、rt-PA組血液TT、Fbg和D-Dimer較對照組有不同程度改變；二者比較，r-PA組對TT和Fbg的影響較rt-PA組小(P<0．05

6、)。實驗兔頭顱MRI檢查表明全部45只實驗兔腦部結(jié)構(gòu)均正常，未見顱內(nèi)出血。直接眼底鏡觀察玻璃體和眼底，均未見玻璃體出血。光鏡下r-PA組和rt-PA組均未見視網(wǎng)膜動脈管腔中有明顯血栓形成，管壁未見明顯壞死或變??；對照組見視網(wǎng)膜動脈內(nèi)血栓形成，血管壁基本完整，未見明顯的壞死或變薄。 結(jié)論： 應(yīng)用光化學(xué)法能成功建立兔RAO模型，且組織學(xué)檢查證實動脈血栓形成同時并無明顯的血管壁損傷；此方法重復(fù)性好、成功率高、安全性好，模型穩(wěn)定